بررسي ميزان شيوع فصلي كمپيلوباكتر ججوناي و كمپيلوباكتركولاي در شيرهاي خام شهرستان آمل با استفاده از روش PCR.M

The study of seasonal incidence of Campylobacter jejuni and Campylobacter coli in raw milks of Amol town through using M. PCR method

در اين مطالعه، تعداد 138 نمونه شير از مراكز جمع آوري شير شهرستان آمل در هر فصل سال (1389) و به روش تصادفي ساده، تهيه شدند. نمونه ها در شرايط سرما به آزمايشگاه منتقل شدند. سپس، نمونه ها به مدت 48 ساعت در محيط كشت آبگوشت غني كننده كمپيلوباكتر تحت شرايط ميكروآيروفيليك در دماي 42 درجه‌ي سانتي‌گراد به مدت زمان 48 ساعت گرمخانه گذاري شدند. محيط‌هاي‌ غني شده به داخل يك محيط كشت انتخابي بر پايه‌ي blood agar انتقال يافتند و دوباره تحت شرايط ذكر شده گرمخانه گذاري شدند. سپس، DNA باكتري از يك ميلي ليتر آبگوشت غني كننده استخراج گرديد. رديابي و شناسايي گونه‌هاي‌ كمپيلوباكتر با روش PCR Multiplexو با استفاده از ژن اختصاصي گونه ججوناي و كولاي صورت پذيرفت. DNA ladder 100 pb به عنوان يك Size Reference براي آزمايش PCR مورد استفاده قرار گرفت. محصول PCR براي گونه‌ي ججوناي pb160 و براي گونه‌ي كولاي bp 894 با ژل الكترفورز شناسايي شد. از مجموع 138 نمونه در هر فصل در فصل بهار، ك. ججوناي 6/6 درصد و ك.كولاي 5/1 درصد، در فصل تابستان، ك. ججوناي 6/11درصد و ك.كولاي 7/3 درصد، در فصل پاييز، ك. ججوناي 1/5 درصد و ك.كولاي 2/2 درصد، در فصل زمستان ك. ججوناي 9/2 درصد و ك.كولاي 8/0 درصد تشخيص داده شدند. نتايج اين مطالعه، نشان داد كه در فصل تابستان، كمپيلوباكتر ججوناي و كولاي در بيش ترين ميزان شيوع و در فصل زمستان در كم‌ترين ميزان شيوع در شيرهاي خام شهرستان آمل بودندp < 0.05)).