بررسي جهش ها در اگزون هاي 23-19 ژن MYH7 در بيماران كارديومايوپاتي هايپرتروفي به روش PCR-SSCP/HA در استان چهارمحال و بختياري

Investigation of mutations in exons 19-23 MYH7 gene in hypertrophic cardiomyopathy patients using PCR-SSCP/HA technique in Chaharmahal va Bakhtiari province

زمينه و هدف: كارديومايوپاتي هايپرتروفي (HCM) رايج ترين نوع از بيماري هاي قلبي است كه 2/0 درصد از جمعيت جهان را تحت تاثير قرار داده و همچنين رايج ترين علت مرگ قلبي ناگهاني در جوانان زير 35 سال است. حدود 35 درصد موارد بيماري مربوط به اگزون هاي 24- 8 از ژن MYH7 است. هدف اين مطالعه بررسي احتمال حضور جهش هاي مربوط به ژن MYH7 در اگزون هاي 23-19 در بيماران HCM استان چهارمحال و بختياري بود. روش بررسي: در اين مطالعه تجربي 30 بيمار مبتلا به HCM به روش نمونه گيري آسان از بين مراجعين به كلينيك قلب دانشگاه علوم پزشكي شهركرد انتخاب شدند. در اين بيماران DNAبه روش استاندارد فنل-كلروفرم استخراج شد. اگزون هاي مورد نظر با استفاده از روش PCR تكثير و با روش SSCP به صورت تك رشته تبديل شد و همراه نمونه هاي دو رشته اي روي ژل پلي آكريل آميد الكتروفورز گرديد. سپس باندهاي مشكوك تعيين توالي گرديد و نتايج با استفاده از نرم افزار Chromas تجزيه و تحليل شدند. يافته ها: در اگزون هاي 20، 21 و 23 تغييري مشاهده نشد، اما در اگزون هاي 19 و 22 دو جهش R719W و R870H يافت شد كه به ترتيب در دو و يك نفر از بيماران وجود داشتند. نتيجه گيري: از آنجا كه تغييرات در اگزون هاي 19 و 22 باعث تغيير اسيد آمينه اي در ميوزين بتا مي شود، جهش هاي ژن MYH7 در اين اگزون ها، احتمالاً سهم به سزايي در بيماران HCM اين استان دارند. به هر صورت، لازم است براي نتيجه گيري بهتر، بيماران بيشتري مورد مطالعه قرار گيرند.

Background and aims: Hypertrophic cardiomyopathy (HCM) is the most prevalent heart disease, affecting 0.2% of the global population. HCM is also the most common cause of sudden cardiac death in individuals younger than 35 years old. Approximately 35% of affected cases are associated with exons 8-24 of MYH7 gene. The aim of this study was to investigate the possible presence of mutation in exons 19-23 MYH7 gene in patients with HCM in Chaharmahal va Bakhtiyari province. Methods: In this experimental study, 30 HCM patients referred to cardiology clinic in Shahrekord University of Medical Sciences were selected by simple sampling. DNA was extracted using standard phenol-chloroform method. Certain exons were amplified by PCR method and converted to single stranded DNAs by SSCP procedure and, along with double stranded DNAs, were electrophorized on polyacryl amid gel. Then, the suspected bands were sequenced and the results were analyzed using Chromas software. Results: In exons 20, 21, and 23, there was no change, but two mutations including R719W and R870H, were observed in exons 19 and 22 in 2 and 1 patient, respectively. Conclusion: Because these changes of exons 19 and 20 result in amino acid changes in beta myosin, the mutations of MYH7 gene in these exons have a significant role in patients in this province. However, it is necessary to study more patients for a better conclusion.