بررسي اثرات سركوب كنندگي ليشمانيا ماژور بر روي عرضه و بيان رسپتور آلفاي اينترلوكين-2 در لنفوسيت هاي T خون محيطي انساني

An In Vitro Study on Suppressive Effects of Leishmania major on IL-2Ra Expression in Activated Peripheral Human T Lymphocyte

چكيده مقدمه: ليشمانيوز از بيماري هاي انگلي است كه به وسيله تك ياخته اي از جنس ليشمانيا ايجاد مي گردد. IL-2 مهم ترين سايتوكايني است كه باعث پيشبرد لنفوسيت هاي T از فاز G1 به S و انتقال به فاز رشد سلولي مي شود. منبع توليد IL-2 سلول هاي CD4+T مي باشد IL-2 بعد از ترشح بر روي سلول هاي T و B و مونوسيت ها و سلول هاي NK تاثير نموده و باعث فعال شدن آن ها مي گردد. در اين مطالعه توانايي پروماستيگوت هاي ليشمانيا ماژور در سركوب و مهار رسپتور آلفاي اينترلوكين-2 ) IL-2R?) در لنفوسيت هايT و در نتيجه مهار سيستم ايمني با استفاده از كشت سلول هاي T خون محيطي انسان فعال شده با فيتوهماگلوتينين در شرايط برون تني( In Vitro) در حضور و عدم حضور انگل و ارزيابي نتايج حاصل از فلوسايتومتري در آن ها، مورد بررسي قرار گرفته است. مواد و روش ها: سويه استاندارد ليشمانيا ماژور(MRHO/IR/75/EK) در محيط NNN كشت داده شده و سپس در محيط RPMI به كشت انبوه رسيده است. لنفوسيت هاي T خون محيطي انساني در محيط RPMI كشت داده شد. از لنفوسيت هاي T تحريك شده با فيتوهماگلوتينين(PHA) در حضور و يا عدم حضور پروماستيگوت هاي انگل، بعد از سپري شدن زمان هاي انكوباسيون مشخص(12، 24 36 و 48 ساعت) نمونه برداري شده و بعد از رنگ آميزي، به وسيله فلوسايتومتري آناليز گرديده است. نتايج به دست آمده از فلوسايتومتري با استفاده از نرم افزار WIN MDI و محاسبات آماري مورد تجزيه و تحليل قرار گرفت. يافته هاي پژوهش: نتايج به دست آمده نشان داده كه ليشمانيا ماژور عرضه و بيان IL-2R? در لنفوسيت هاي T و نيز لنفوپروليفراسيون را مهار و سركوب مي نمايد كه اولين نشانه هاي مهاري انگل 6 ساعت بعد از تحريك لنفوسيت ها ديده شده و افزايش تعداد پروماستيگوت هاي انگل در هر ميلي ليتر از محيط كشت باعث تشديد سركوب هاي ايجاد شده مي گردد. بحث و نتيجه گيري: از نتايج به دست آمده استنباط مي گردد كه ليشمانيا ماژور به عنوان سركوب كننده و مهاركننده سيستم ايمني و پاسخ هاي ايمني بدن مطرح اند بنا بر اين بيماران مبتلايان به بيماري ليشمانيوزيس شديداً در معرض عفونت هاي ثانويه ويروسي و باكتريايي و... مي باشند.

Introduction: Leishmaniasis is a parasitic disease which caused by a protozoan belong to the genus, Leishmania. IL-2 is an important cytokine that progresses lymph-ocytes from G1 to S phase, leading to T cells growth and proliferation. IL-2 is produced by activated CD4+ T cells and stimulates T and B lymphocytes, monocy-tes and natural killer cells. The present study was designed to determine and define the leishmania major-induced suppression of IL-2R? expression in the peripheral human T-lymphocytes in vitro condition. Materials & Methods: Leishmania major standard strain (MRHO/IR/75/EK) was cul-tured in the NNN medium and proliferated in RPMI medium. Human peripheral T lymphocytes were also cultured in RPMI medium. Phytohemaglutinin-stimulated lymphocytes, in the present and/or absent of leishmania major promastigotes, were sam-pled at the incubation times, 12, 24, 36, 48h, stained with FITC-labelled anti-CD25 (IL-2R? chain MAb) and PE-labelled anti-CD4 (CD4 MAb) and then, analyzed by flowcytometry. Data were analyzed by us-ing the WIN MDI software and statistical tests. Findings: Results of this study showed that leishmania major suppressed the expression of IL-2R in the activated T cells and inhib-ited the proliferation of lymphocytes. We found the expression of IL-2R by human peripheral T Lymphocytes. These T cells that co-cultured with leishmania major and stimulated with Phytohemagglutinin, were significantly suppressed 6h after culture initiation. However, the suppressed effect was seen to be moderate. The magnitude of this effect further increased when greater numbers of promastigotes were added. Discussion & Conclusion: Inhibition of IL-2R expression by the leishmania parasite may play a role in the suppressive effects associated with leishmaniasis disease. Molecular and biochemical characterization of the leishmania immuno suppressive fac-tors can be useful for vaccine development and also for drug related studies.