بررسي خاصيت تهاجمي سلولي سروتيپ هاي شيگلا جدا شده از بيماران مبتلا به اسهال در كشت سلولي HEp-2

Investigation the Shigella serotypes invasive cells isolated from patients with diarrhea in HEp-2 cell culture

زمينه و هدف: اسهال يكي از مهمترين علل مرگ و مير كودكان در كشورهاي در حال توسعه است. بيماري هاي روده اي سالانه سبب مرگ بسياري از كودكان زير 5 سال مي گردند. يكي از روش هايي كه امكان بررسي خاصيت تهاجمي باكتري ها را مي دهد، استفاده از كشت سلول است. هدف از اين مطالعه بررسي خاصيت تهاجمي تعدادي از سويه هاي جنس شيگلا با استفاده از كشت سلولي HEp-2 بوده است. روش بررسي: در اين مطالعه توصيفي تحليلي، سوآپ ركتال هاي تهيه شده از 280 بيمار مبتلا به اسهال (140 بيمار با اسهال خوني و 140 بيمار با اسهال آبكي به عنوان گروه مقايسه) مراجعه كننده به بيمارستان هاي امام خميني و مركز طبي كودكان، قبل از دريافت آنتي بيوتيك و 140 نمونه از افراد سالم به عنوان گروه شاهد مورد بررسي قرار گرفتند. نمونه ها در محيط هاي افتراقي و انتخابي هكتون و XLD آگار تلقيح و پس از 24 ساعت انكوباسيون در 37 درجه سانتي گراد، از نظر مورفولوژي بررسي و با استفاده از تست هاي بيوشيميايي شناسايي شدند. براي بررسي خاصيت تهاجمي شيگلا در كشت سلولي HEp-2علاوه بر ايزوله هاي آن، از 20 سوش كلكسيون نيز استفاده گرديد. همچنين الگوي مقاومت آنتي بيوتيكي آن ها طبق دستورالعمل CLSI انجام شد. يافته ها: 36 سوش شيگلا (6/8%)، از نمونه هاي مورد بررسي جدا گرديد. بيشترين گونه جدا شده از بيماران، Shigella flexneri با 16 ايزوله بود. بررسي بر روي كشت سلولي HEp-2 نيز نشان داد كه تنها 14 سوش شيگلا (9 ايزوله و 5 كلكسيون) خاصيت تهاجمي داشتند. نتيجه گيري: نتايج بدست آمده نشان مي دهد اولاً تمامي ايزوله هاي شيگلا برخلاف انتظار قابليت حمله و تهاجم به سلول هاي اپتلييال روده را ندارند؛ ثانياً تهاجم يك صفت ثابتي است كه در اثر زمان از بين نمي رود.

Background and aims: Diarrhea is one of the most prevalent cause of children`s death in developing countries. Gastrointestinal diseases are the cause of much death among the children under the age of 5 every year. In this study the invasiveness character of Shigella strains was investigated by HEp-2cell cell culture technique. Methods: In this descriptive study, 280 rectal swabs (140 with dysentery and 140 watery diarrhea) from patients suffering from diarrhea before using any antibiotic and 140 from healthy people as control group were collected. These specimens were cultured in Hektoen and XLD agar as selective and differential media, then after 24 hours incubation in 37?C their morphology were studied and finally the isolates were confirmed with biochemical tests. Shigella spp strains consist of 20 collection strains were used for consideration of invasiveness in Shigella. Antibiotic typing also performed according to CLSI instructions. Results: Thirty six strains of Shigella (8.6%) were isolated from thesamples under the study. Most strains isolated from patients, were Shigella flexneri isolated with 16. Our study on HEp-2 cell cultures showed that only 14 (9 isolates, 5 collections) had invasive properties of Shigella strains. Conclusion: The results show that firstly all Shigella isolates are not capable of invading intestinal epithelial cells; Secondly invasion is not a constant attitude and it would not go away by time.