شناسايي ملكولي و سروتايپينگ O در سويه هاي اشريشيا كلي مولد ورو توكسين در عفونت هاي ادراري در شهر تهران

Molecular Characterization and O- Serotyping in Verocytotoxin-Producing Escherichia coli Isolates from Urinary Tract Infection in Tehran

زمينه و اهداف: باكتري اشريشيا كلي مولد سم وروتوكسين عامل بيماري هاي مهمي در انسان مي‌باشد. بررسي حضور و شيوع ژن‌هاي كد كننده سموم مذكور در سويه‌هاي جداشده از عفونت‌هاي ادراري با توجه به سرو تايپ O آنها از اهداف اين بررسي بوده‌اند. روش بررسي: از تعداد 300 نمونه‌ي ادرار افراد مبتلا به عفونت ادراري، اشريشيا كلي از طريق كيت تشخيصي انتروباكترياسه شناسايي گرديد. براي سروتايپينگ، بترتيب سويه‌ها با آنتي سرم پلي‌والان و منو‌والان مورد آزمون قرار گرفتند. سويه‌هاي مول وروتوكسين از طريق PCR مشخص شدند و با كشت سويه‌ها در محيط سوربيتول مكانكي آگار، سرو تايپ‌هاي O157 از گروه‌هاي غير O157 تفكيك شدند. براي نشان دادن بيان ژنهايvtx2 , vtx1 از روش آگلوتيناسيون سريع و پاسيو لاتكس استفاده گرديد. يافته ها: از كل نمونه هاي ادراري، 180 مورد از نظر اشريشياكلي كشت مثبت داشتند كه از آنها 158 مورد واحد ژنهايويروالانس بودند و همه آها بعد از كاربرد روش آگلوتيناسيون سريع و پاسيولاتكس، اثر سمي نشان دادند. 24 درصد نمونه ها بصورت گروه O157 و 76 درصد بصورت گروه غير O157 طبقه بندي شدند. شايعترين ژنهاي ويروالانس در سويه هاي O26 يافت شدند كه واجد ژنهاي vtx1 بودند. نتيجه گيري: يافته‌هاي ما نشان داد كه شيوع سويه‌هاي مولد سم ورو توكسين غير O157 عامل عفونت ادراري جدا شده در شهر تهران بيشتر از سويه‌هاي O157 بوده است. استفاده از روش‌هاي PCR و ايمونولوژيك امكان شناسايي دقيقتر سويه‌هاي مولد ورو توكسيكوژنيك O157از غير O157 را ميسر مي‌سازد.

Background and Objectives: Verocytotoxin-producing: Escherichia coli strains are important human pathogens. Here we studied the prevalence of virulence genes and O stereotyping in strains isolated from urine samples. Materials and Methods: In this study, 300 urine samples from individuals with urinary tract infections E. coli was isolated using enterobacteriase diagnostic kit .The strains were examined with polyvalent and monovalant antiserum for O-serotyping. Verocytotoxin-producing E. coliv strains were characterized by polymerase chain reaction. O157 groups were distinguished from non O157 groups by culturing in sorbitol macconkey agar. Rapid Passive Latex Agglutination (RPLA) technique was performed in order to find the expression of vtx1 and vtx2 genes. Results: From total number of 300 urine samples, 180 samples had positive culture result for E. coli of these, 158 strains had virulence genes and all of them showed a toxic effect after applying Rapid Passive Latex Agglutination technique. Twenty four percent of samples were classified as O157 group and 76% as non O157 group. The most prevalent virulence genes were found in O26 strains containing vtx1 genes. Conclusion: Our findings showed that non-O157 verocytotoxin-producing E.Coli is more prevalent than O157 strains in our study.