اثر عصاره زعفران بر بيان ژن A VEGF در سلول‌هاي سرطان پستان MCF7

Effect of saffron extract on VEGF-A expression in MCF7 cell line

زمينه: مطالعات مختلف بر اثرات ضد سرطاني زعفران تاكيد دارد. آنژيوژنز يا تشكيل رگ‌هاي خوني جديد، كه براي تكوين جنين و بسياري از وقايع فيزيولوژيكي مورد نياز است در بسياري از شرايط پاتولوژيك نظير رشد تومورها ضروري است. يكي از ژن‌هاي فعال در روند رگ‌زايي VEGF A مي‌باشد. در اين پژوهش اثرات عصاره آبي زعفران بر ميزان بيان اين ژن بررسي گرديد. روش‌ها: عصاره آبي زعفران به‌روش سوكسله تهيه و به روش انجماد و خشك كردن در خلا (lyphilization) با استفاده از دستگاه freeze dryerبه ‌شكل پودر تهيه گرديد. سلول‌هاي MCF7 در محيط كشت RPMI1640 غني شده با 10% FBS كشت داده شد. پس از 24 ساعت، سلول ها توسط عصاره در غلظت‌هاي 100، 200، 400 و 800 ميكروگرم بر ميلي‌ليتر تيمار گرديدند. 48 ساعت پس از تيمار، RNA تام استخراج و cDNA با استفاده از توالي ژن مورد نظر سنتز شد و محصولات سنتزشده توسط دستگاه Real Time PCR جهت بررسي سطح بيان ژن VEGF A مورد ارزيابي قرار گرفت. يافته‌ها: نتايج بررسي آماري داده‌ها نشان داد كه كاهش معنادار (05/0(P < در ميزان بيان ژن VEGF-A تيمارشده با غلظت‌هاي 100، 200، 400 و 800 ميكروگرم بر ميلي‌ليتر عصاره زعفران نسبت به سلول‌هاي گروه كنترل ديده مي‌شود به‌نحوي‌كه بيشترين تغييرات كاهشي بيان ژن مربوط به بيشترين غلظت عصاره زعفران بود. نتيجه‌گيري: نتايج بيانگر كاهش بيان ژن VEGF A، بيوماركر ويژه آنژيوژنز در نمونه‌هاي تحت تيمار در مقايسه با گروه كنترل است.

Background: Various studies have focused on the anticancer effects of saffron. Angiogenesis or new blood vessel formation, which is required for embryonic development and many physiological events, plays a crucial role in many pathological conditions such as tumor growth. One of the main genes which is involved in the process of angiogenesis is VEGF-A. In this in vitro study, the effects of saffron extract on VEGF-A expression were examined. Methods: In this experimental study, the saffron extract was obtained by Soxhlet extractor and then the powder was frozen and dried in vacuum (lyophilisation) using a freeze dryer. MCF7 cells were grown in RPMI 1640 medium supplemented with 10% Fetal Bovine Serum (FBS) and incubated at 37?C with 5% CO2. After 24 h of cell culture, their adhesion to the bottom flasks was investigated, then, they were treated by the aqueous extract of saffron at concentrations of 100, 200, 400 and 800 µg/ml. 48 hours after treatment, total RNA was extracted and cDNA was synthesized using the sequence of target gene. Finally, the synthesized products were analysed by Real Time PCR to determine the expression level of VEGF-A. Results: The results of data analysis showed the inhibitory effect of saffron extract in concentrations of 100, 200, 400 and 800 µg/ml on VEGF-A expression in MCF7 cells in comparison with control group, indicating the highest reduction of gen expression for the highest concentration of saffron extract (800 µg/ml). Conclusion: Results indicated a decrease in the expression of VEGF-A, specific biomarker of angiogenesis, in the treated samples compared to the control group.