نخستين گزارش ازGliomastix murorum براي فلور قارچي ايران

First report of Gliomastix murorum for Iran mycoflora

طي سالهاي 92-1391، حضور گونه‌هاي آسكوميست از خاك‌هاي مناطق مختلف استان كرمانشاه مورد بررسي قرار گرفت. در هر مكان نمونه‌هاي خاك از عمق 30-0 سانتي‌متري جمع‌آوري و پس از عبور از الك دو ميلي‌متري، از الك‌هاي شماره 40 و 60 نيز عبور داده شدند. با استفاده از روش تهيه رقت، 10 گرم خاك در 90 ميلي‌ليتر آب آگار يك 1/0 درصد حاوي 100 قسمت در ميليون دترجنت ريخته و سپس براي تهيه سوسپانسيون مخلوط شدند. رقت‌هاي 2-10 تا 5-10 تهيه و يك ميلي‌ليتر از هر رقت روي محيط كشت‌هاي عصاره مالت- آگار و عصاره سيب‌زميني- دكستروز- آگار ريخته شد. براي جلوگيري از رشد باكتري‌ها، به محيط‌هاي كشت، رز بنگال به ميزان 45 ميكروگرم بر ميلي‌ليتر و كلرامفنيكل به ميزان 25 ميكروگرم بر ميلي‌ليتر اضافه شد. محيط‌هاي كشت در دماي 25 درجه سلسيوس به مدت سه تا پنج روز قرار گرفتند. تمام جدايه‌ها براساس كليدهاي تاكسونوميكي موجود تشخيص داده شدند كه براساس خصوصيات ريخت‌شناختي فرم غيرجنسي شامل؛ طناب ميسليومي، كنيديوفور، فياليد و كنيديوم گونه Gliomastix murorum براي فلور قارچي ايران جديد بود. براي تاييد تشخيص، دي. ان. اي. ژنومي قارچ استخراج و ناحيه توالي‌هاي ITS1+5.8S+ITS2 دي. ان. اي. ريبوزومي جدايه‌هاي مذكور با استفاده از واكنش زنجيره‌اي پلي‌مراز تكثير و قطعات تكثير يافته، تعيين توالي گرديدند. پس از توالي‌يابي اين ناحيه و ذخيره آن در بانك ژن، نسبت به ارزيابي همولوژي اين توالي 600 جفت بازي با توالي‌هاي موجود در بانك ژن به كمك ابزار جستجوي BLAST اقدام گرديد. جدايه‌هاي ايراني با ديگر جدايه‌هاي موجود در بانك ژن شباهت 100 درصدي نشان دادند. نمونه‌هاي سند در بخش گياه‌پزشكي دانشكده كشاورزي دانشگاه رازي (كرمانشاه) نگهداري شدند. - ويژگي گونه تشخيص داده شده بعد از يك هفته در دماي 25 درجه سلسيوس، رشد پرگنه روي محيط كشت عصاره مالت- آگار، به 2 تا 3 ميلي‌متر مي‌رسد. طناب‌هاي ميسليومي تيره‌رنگ و به قطر (6/11-4/7)7/9 ميكرومتر، فياليدها به رنگ روشن، مستقيم و انحنادار به طول (2/23-2/18) 8/20 ميكرومتر بودند (شكل 1). كنيديوم‌ها بيضوي، به رنگ روشن تا نيمه‌روشن كه به صورت زنجيري روي فياليد تشكيل مي‌شوند. اندازه كنيديوم‌ها (8/4-3)4 × (9/2-9/1)3/2 ميكرومتر بود (شكل 1).

During 2012–13, the presence of ascomycetous species in soil was studied in Kermanshah province (W Iran). In each location, samples were collected from 0–30 cm depth and passed through 2 mm, 40 and 60 mesh sieves. Using soil plating method, 10 g of soil samples were placed in 90 ml of 0.1% water-agar containing 100 ppm NPX, mixed and serially diluted to 10-2 to 10-5 and 1 ml of each solution flooded on potato dextrose agar (PDA) and malt extract agar (MEA) by an L-shaped rod. These media were amended with rose bengal (45 µg/ml) and chloramphenicol (25 µg/ml). Plates were incubated at 25–27? C for 3–5 days to allow the fungi grow. Isolates were recovered from soil using malt extract agar (MEA) and potato dextrose agar (PDA) media. Anamorphic characteristics such as mycelial strands, conidiophores, phialides and conidia were investigated. Fifty measurements of each type of structure were made using BioloMICS Measure software. Radial growth of the isolates was measured on MEA and PDA after seven days at 25? C.