معرفي پپتيد ضدميكروبي جديد با نام Buforin–K از ترشحات پوستي وزغ كويري بومي يزد

Purification and Characterization of a New Antimicrobial Peptide from Skin Secretions of Bufo Kavirensis

مقدمه: امروزه تحقيق در زمينه پپتيدهاي ضدميكروبي به يك عرصه فعالي بدل شده است. بنابراين، هدف اين مطالعه خالص سازي و تعيين خواص بيوشيميايي )به ويژه اثر ضدميكروبي( پپتيدهاي جديد از ترشحات پوستي وزغ كويري است. روش بررسي: در اين مطالعه توصيفي ترشحات پوستي وزغ با استفاده از روش هاي بيوشيميايي خالص سازي گرديد و اثرات ضدميكروبي آن توسط روش نشر شعاعي و حداقل غلظت مهاري مشخص شد. توالي پپتيدها نيز توسط روش اسپكتروسكوپي تعيين شد. نتايج: يك پپتيد ضدميكروبي جديد از ترشحات پوستي به دست آمد. اين پپتيد از 20 آمينواسيد ساخته شده است. اين پپتيد با هيچ يك از پپتيدهاي ضدميكروبي از دوزيستان همساني نداشت. بنابراين اين پپتيد جديد، Buforin–K نام گرفت. اين پپتيد از لحاظ فعاليت ضدميكروبي ارزيابي شد. پپتيد Buforin–K فعاليت ضدميكروبي قابل توجهي را عليه باكتري هاي گرم منفي و گرم مثبت (با حداقل غلظت مهاري در محدوده 1/8 تا µg/ml 6/35( و همچنين عليه قارچ ها (حداقل غلظت مهاري اين پپتيد در محدوده 7/25 تا 6/35 ) از خود نشان داد. اين پپتيد اثر ضدميكروبي بيشتري بر روي باكتري هاي گرم منفي در مقايسه با باكتري هاي گرم مثبت و قارچ ها دارد. Buforin–K فعاليت هموليزي پاييني را بر روي اريتروسيت ها نشان داد، به طوري كه در غلظت µg/ml100، سبب القاي 5 درصد هموليز شد. نتيجه گيري: با توجه به اثرات زيستي مفيد، MaximinBk مي تواند يك ماده مستعد براي درمان بيماري هاي عفوني مختلف باشد.

Introduction: Today, research in the field of antimicrobial peptides is active. Thus, the aim of this study is to purify and determine biochemical properties (especially antimicrobial effect) of new antimicrobial peptides from skin secretions of bufo kavirensis. Methods: This is a descriptive study. The skin secretions of bufo was purified by biochemical manners and antimicrobial effects was characterized by radial dffusion assay and minimal inhibitory concentration. The sequence of peptides was also determined by using MS/MS. Results: A novel antimicrobial peptide was obtained from skin secretions. This peptide is composed of 20 amino acids. This peptide does not present any similarity with the other antimicrobial peptides from the amphibians. Thus, it was named Maximin Bk. The peptide was subjected to antimicrobial activity assays. The Buforin–Kpeptide showed considerable antimicrobial activity against Gram positive and Gram negative bacteria (minimum inhibitory concentrations (MIC), 8.1 to 20.78 µg/ml) as well as fungi (MIC, 25.7 to 35.6 mg/ml). Moreover, this peptide showed higher antimicrobial activity against Gram-negative than against Gram-positive bacteria and fungi. Maximin Bk showed virtually low hemolytic activity, which, at a concentration of 100 ?g/mL, induced 5% hemolysis. Thus, a very slight haemolytic activity was obtained against human erythrocytes. Conclusion: On the basis of the biological effects, Buforin–Kcan can be regarded as the potent agent for treatment of various microbial diseases.