مطالعه چندشكلي ژن IGFBP3 و ارتباط آن با صفات لاشه و تركيب اسيدهاي چرب و برخي فراسنجه هاي خون در گوسفند نژاد زل با روش PCR-SSCP

Study polymorphism of ovine IGFBP-3 Gene and its association with carcass traits and fatty acids profiles in Zel sheep using PCR-SSCP

هورمون IGF1 در مايعات بيولوژيك به يكي از پروتيين هاي باند شونده متصل مي شود كه عمده ترين آنها تيپ 3 (3IGFBP) مي باشد. اين پروتيين به عنوان حامل IGF1 عمل كرده و نيمه عمر آن را طولاني تر مي كند و در سطح سلولي سبب افزايش يا كاهش فعاليت بيولوژيكي IGF مي شود. تحقيق حاضر با هدف مطالعه ارتباط چندشكلي اين ژن با صفات لاشه و تركيبات اسيد چرب در گوسفند نژاد بي دنبه زل با روش PCR-SSCP انجام شد. در اين پژوهش 130 راس گوسفند زل به طور تصادفي مورد خون گيري و ثبت صفات لاشه قرار گرفتند. براي مطالعه اسيدهاي چرب، خون گيري با ونوجكت هاي EDTA دار انجام شد و بلافاصله نمونه ها براي جداسازي پلاسما سانتريفيوژ شدند. استخراج DNA از بافت ماهيچه بوسيله كيت شركت BIOTECH صورت گرفت. سپس PCR براي تكثير قطعه 654 جفت-بازي ژن IGFBP3 انجام گرفت. براي تعيين چندشكلي نمونه ها، الكتروفورز محصولات PCR پس از تك رشته شدن قطعات (روش SSCP) روي ژل اكريل آميد و رنگ آميزي ژل به روش نيترات نقره انجام شد. نتايج بيانگر وجود الگوهاي متفاوت بود كه مي تواند ناشي از وجود چندشكلي در اين جايگاه باشد. فراواني الگوهاي ژنوتيپي 1، 2، 3، 4 و 5 ژن IGFBP3 در اين جمعيت به ترتيب 67/66، 33/3، 67/6، 33/13 و 10 درصد بود. صفات وزن لاشه گرم (P < 0.05)، ضخامت چربي پشت (P < 0.01) و پروتيين خام گوشت(P < 0.01) ارتباط معني دار با الگو هاي مختلف نشان دادند. درمورد تركيبات اسيد چرب هم تنها ارتباط معني دار بين اسيدچرب هپتادكانوييك (C17:0) با الگوهاي مختلف ژن IGFBP3 مشاهده شد(P < 0.01). بين ساير صفات و اسيدهاي چرب هيچ ارتباط معني داري با الگو هاي IGFBP3 در اين تحقيق مشاهده نشد.

IGF-1 hormone transports by connecting to IGF-binding proteins (often IGFBP-3) in the biological fluids. This protein acts as an IGF1 carrier and helps to prolong half-life of hormone and can increase or decrease biological activity of hormone on cellular surface. The purpose of the research was to study the polymorphisms of IGFBP-3 gene and its association with carcass traits and fatty acids profiles in Zel sheep as a thin-tailed breed using PCR-SSCP. In this study we used 130 Zel sheep randomly and recorded their traits measure we wanted. to determine of fatty acids, we took 6ml blood in venojects containing EDTA and immediately centrifuged them for 10 minutes by 3000g (5200 rpm) to separate the plasma. DNA was extracted from muscle tissue by Biotech company kit. Then the Polymerase chain reaction (PCR) used to amplify of 654 bp fragment of exon 3 of IGFBP-3 gene. PCR products were electrophoresed on polyacrylamide gel (method SSCP) and stained with silver nitrate method to distinguish different patterns. Results indicated the different patterns, may be due to polymorphism in this fragment. Frequency of patterns 1, 2, 3, 4 and 5 were 67/66, 33/3, 67/6, 33/13 and 10 percent respectively. Trait carcass weight (P < 0.05), back fat thickness (P < 0.01) and crude protein in meat (P < 0.01) had significantly differences with different patterns. Significant association observed by Heptadecanoic acid (C17: 0) with different patterns of IGFBP3 gene. No other association was observed by IGFBP3 patterns with other traits and fatty acids profiles