بررسي حضور رونوشت‌هاي ژن جوششي MLL-AF4 در بيماران لوسمي لنفوييدي حاد مراجعه كننده به بيمارستان كودكان تبريز

MLL-AF4 fusion transcripts in Acute Lymphocytic Leukemia patientsin Children hospital of Tabriz

زمينه: لوسمي‌هاي 4MLL-AF مثبت در حدود 70-50 درصد لوسمي‌هاي حاد لنفوييدي كودكان و حدود 5 درصد لوسمي‌هاي حاد لنفوييدي نوجوانان و بالغين را شامل مي‌گردد. علي‌رغم پيشرفت‌هاي اخير در درمان بدخيمي‌هاي خوني كودكان به‌ويژه لوسمي لنفوسيتي حاد، به‌نظر مي‌رسد نتايج ضعيفي از درمان اين نوع بدخيمي حاصل مي‌شود، شايد دليل اين نكته عدم شناخت كافي و مناسب از الگوي ژنتيكي پروتيين‌هاي نوتركيب ناشي از جابجايي‌هاي كروموزومي باشد. در اين مطالعه سعي شده است از ديدگاهي خاص به بررسي اختلال شايع كروموزومي (4،11)t پرداخته شود: به‌علت نبود آمار دقيق اين نوع جابجايي‌ها در كشور، آمار قابل قبول ارايه شود؛ درصد شيوع انواع ايزوفرم‌هاي درگير در ژن نوتركيب 4MLL-AF بيان گردد. مواد و روش‌ها: در يك مطالعه مورد- شاهدي، از 36 بيمار مبتلا به ALL در فاصله سني 4 ماه الي 11 سال، نمونه‌گيري از خون پيراموني به‌عمل آمد و RNA توتال استخراج و cDNA از آن تهيه گرديد. آنگاه cDNA جهت تكثير در دو مرحله وارد واكنش PCR وNested PCR شد. پس از انجام الكتروفورز محصولات حاصل در كنار كنترل داخلي مقايسه و آناليز گرديدند. يافته‌ها: نتايج نشان داد كه بيان ژن نوتركيب4MLL-AF در محدوده‌ي سني 4 الي 12 ماه بيشترين مقدار را در مرحله دوم و توسط (Nested PCR) داراست. همچنين بيشترين فراواني ايزوفرم درگير در ژن‌هاي نوتركيب در همان محدوده سني، ايزوفرم 11e-4e با 13/0 مي‎باشد. نتيجه‌گيري: به‌نظر مي‌رسد بررسي اختلالات و جابجايي‌هاي كروموزومي با استفاده از روش‌هاي مولكولي مناسب‌ترين و دقيق‌ترين روش براي مشخص كردن ويژگي‌هاي كروموزومي بيماران مبتلا به لوسمي حاد به‌ويژه لوسمي حاد لنفوييدي باشد.

Background: MLL-AF4 positive Leukemias comprise about 50-70% of acute lymphoid leukemias in children and about 5% of adolescents and adults Despite recent advances in the treatment of hematologic malignancies of children with ALL in particular, but it seems that poor results are obtained from treating this type of malignancy. Perhaps it is due to the lack of enough knowledge about the expression pattern of the fusion gene induced by chromosomal translocations. This study aims to consider several aspects of the common chromosomal disorder, t (4; 11): due to lack of accurate statistical results for this type of translocation in our country, acceptable results are provided; Sprevalence of isoforms of recombinant genes involved in MLL-AF4 are explained. Materials and methods: Of 36 patients with ALL between 4 months -11 years of age, peripheral blood sampling was done and total RNA extracted and cDNA was made. Then cDNA was amplified in two steps with the PCR and Nested PCR reactions. After electrophoresis the products were compared and analyzed in comparison with the internal control. Results: The results showed that MLL-AF4 recombinant gene expression in the age between 4 to 12 months range is maximum in the second stage by Nested PCR. Also the highest frequency of fusion isoforms of the gene involved in the same age range is e11-e4 isoform with the frequency of 0.13. Conclusion: It seems that investigation of translocation and chromosomal abnormalities using molecular techniques is one of the most accurate and suitable methods for identifying chromosomal characteristics in patients with acute leukemia, particularly ALL.