مهار مسيرهاي سيگنالي فاكتورهاي رشد توسط داروي ايماتينيب مسيلات در سلول‌هاي لايديگ نرمال موشي

INHIBITION OF GROWTH FACTOR SIGNALING PATHWAYS BY IMATINIB MESYLATE IN MOUSE NORMAL LEYDIG CELLS

پيش زمينه و هدف: تكثير سلول‌هاي سرطاني ممكن است از فسفوريلاسيون غير طبيعي مسيرهاي سيگنالي پايين دست گيرنده‌هاي تيروزين كينازي چون گيرنده‌هاي فاكتورهاي رشد مشتق از پلاكت ? (PDGFR-?) و B (PDGFR-B) ناشي ‌شود. به دليل نقش حياتي اين مسيرها در سلول‌هاي طبيعي، درمان سرطان‌ها با داروهاي مهار كننده تيروزين كينازي مانند ايماتينيب مسيلات اغلب منجر به اختلالات عملكرد سلول‌هاي طبيعي همانند سلول‌هاي لايديگ مي‌شود. هدف اين تحقيق بررسي ميزان آپوپتوز و فسفوريلاسيون PDGFR-? و PDGFR-B در سلول‌هاي لايديگ نرمال موشي در مواجهه با داروي ايماتينيب مي‌باشد. مواد و روش‌ها: سلول‌هاي لايديگ موشيTM3 با غلظت‌هاي 0، 2.5، 5، 10 و 20 ميكرو مول داروي ايماتينيب به مدت 2، 4 و 6 روز تيمار گشتند. ميزان آپوپتوز و فسفوريلاسيون گيرنده‌هاي PDGF به ترتيب با روش‌هاي اندازه‌گيري فعاليت آنزيم كاسپاز3 و ايمونواسي فلورسانس بررسي گرديد. جهت تحليل داده‌ها از تست‌هاي ANOVA و t-test استفاده شد. يافته‌ها: ميزان فسفوريلاسيون PDGFR-? در گروه تيمار شده با دارو (08/0±21/0) و گروه كنترل (13/0±35/0) تفاوت آماري معني‌داري داشت (05/0 > P) و با افزايش دوز دارو ميزان فسفوريلاسيون كاهش بيشتري مي‌يافت (05/0 > P). ميزان آپوپتوز و فسفوريلاسيون PDGFR-B در بين دو گروه تفاوت آماري معني‌داري نداشت، هر چند كه با افزايش مدت زمان مواجهه ميزان PDGFR-B نيز كاهش بيشتري نشان داد (05/0 > P). نتيجه گيري: داروي ايماتينيب با مهار مسيرهاي سيگنالي پايين دست فاكتورهاي رشد خصوصاً مهار فسفوريلاسيون PDGFR-? در سلول‌هاي لايديگ نرمال ممكن است باعث اختلال در رشد اين سلول‌ها گردد. به نظر مي‌رسد كه اين دارو تاثيري در فعال سازي مسيرهاي آپوپتوزي اين سلول‌ها ندارد

Background & Aims: Cancer cells proliferation may be mediated by abnormal phosphorylation of signaling pathways downstream of tyrosine kinase receptors such as Platelet derived growth factor receptor ? (PDGFR-?) and B (PDGFR-B). We aimed to study the phosphorylation level of PDGFR-? and PDGFR-B and apoptosis in mouse normal leydig cells being exposed to Imatinib. Materials & Methods: The mouse TM3 leydig cells were treated with 0, 2.5,5,10 and 20 ?M Imatinib for 2, 4, and 6 days. The apoptosis and phosphorylation level of PDGFRs were assessed by caspase-3 activities colorimetric and fluorescence immunoassay methods, respectively. For statistical analysis, one-way ANOVA and T-test were performed. Results: Phosphorylation level of PDGFR-? in the treated (0.21±0.001) and control cells (0.35±0.13) was significantly different (P < 0.05), and its level decreased with increasing drug dosage (P < 0.05). PDGFR-B level and apoptosis had no significant differences between groups, although PDGFR-B level decreased significantly with increasing exposure duration (P < 0.05). Conclusion: By inhibition of signaling pathways downstream of growth factors specifically PDGFR-? phosphorylation blockage in normal leydig cells, Imatinib may interfere with cellular growth. It seems that this drug has no effect on apoptotic pathways. Keywords: Apoptosis, Imatinib mesylate, Leydig cells, Platelet derived growth factor receptor