تاثير عصاره پانكراس بر تمايز سلول هاي ترشح كننده انسولين از سلول هاي بنيادي مزانشيمي مغز استخوان موش كوچك آزمايشگاهي

Effect of pancreatic extract on insulin secreting cell differentiation from mouse bone marrow mesenchymal stem cells

زمينه و هدف: با ديابت نوع يك در نتيجه ي تخريب خود ايمني سلول هاي بتاي جزاير پانكراس ايجاد مي شود. مطالعات اخير نشان مي‌دهد بسياري از انواع سلول هاي بنيادي مي توانند به عنوان منابع احتمالي براي به دست آوردن سلول هاي قابل پيوند توليد كننده انسولين (IPCs) در نظر گرفته شوند. در اين مطالعه تمايز سلول هاي بنيادي مزانشيمي مغز استخوان به سلول هاي مولد انسولين با استفاده از عصاره پانكراس موش مورد بررسي قرار گرفت. روش بررسي: در اين مطالعه تجربي آزمايشگاهي از سلول هاي بنيادي مزانشيمي مغز استخوان موش كوچك آزمايشگاهي براي تمايز به سلول هاي انسولين ساز استفاده شد. سلول هاي تمايز يافته با استفاده از رنگ اختصاصي ديتيزون و آنتي بادي هاي ضد انسولين- پروانسولين و ضد رسپتور بتاي انسولين مورد ارزيابي قرار گرفتند. همچنين بيان ژن اختصاصي سلول هاي پانكراسي يعني pdx-I در اين سلول ها با روش RT-PCR بررسي شد. يافته ها: سلول هاي تمايز يافته مشتق از روش مستقيم مورفولوژي مشابه با سلول هاي بتاي پانكراس نشان دادند. سلول هاي ديتيزون مثبت به صورت دستجات قرمز ارغواني ديده شدند. نتايج بررسي RT-PCR بيان ژن اختصاصي سلول هاي بتا (pdx-I) را در سلول هاي تمايز مستقيم نشان داد. ايمنوفلورسنس وجود نشانگرهاي اختصاصي سلول هاي بتا را دراين سلول ها به اثبات رساند. نتيجه گيري: نتايج اين مطالعه نشان داد كه سلول هاي بنيادي مزانشيمي مغز استخوان مي توانند در حضور عصاره پانكراس به سلول هاي مولد انسولين تمايز يابند؛ لذا استفاده از اين نتايج توليد سلول هاي بتا از سلول هاي بنيادي در شرايط آزمايشگاهي را تسهيل مي كند.

Background and aims: Diabetes type 1 is developed as a result of autoimmune destruction of pancreatic islet beta cells. Recent studies indicated that many types of stem cells could be considered ad potential sources of obtaining Insulin like producing cells (IPCS). In this study, the differentiation of bone marrow mesenchymal stem cells into insulin-producing cells was investigated using mouse pancreatic extract. Methods: In this laboratory experimental study, bone marrow mesenchymal stem cells were used to differentiate into insulin-producing cells. The differentiated cells were assessed using dithizone-specific staining and anti-insulin-proinsulin and anti-insulin receptor beta antibodies. In addition, specific gene expression of pancreatic cells was assessed by RT-PCR method. Resaults: The differentiated cells derived from direct method of morphology were represented as pancreatic beta cells. Positive dithizone cells were observed as red-purple bundles. The results of RT-PCR represented specific gene expression of beta cells in the differentiated cells as direct. Immunofluorescence confirmed the presence of beta cells specific markers in these cells. Conclusion: The results of this study indicated that bone marrow mesenchymal stem cells could differentiate into insulin-producing cells in presence of pancreatic extract. Therefore, application of these results facilitates in vitro production of beta cells from stem cells.