تاثير سينرژيك سيم واستاتين در افزايش آثار ضد توموري آرسنيك تري‌اكسيد در رده سلولي لوسمي پروميلوسيتي حاد انساني (NB-4)

Simvastatin synergistically potentiating the anti-tumoreffects of arsenic trioxide on human promyelocyticleukemia (NB-4) cells

چكيده سابقه و هدف تاثير آرسنيك تري‌اكسيد(ATO)، به عنوان يك تركيب سمي، در درمان لوسمي پروميلوسيتي حاد(APL) مورد پذيرش گسترده قرار دارد. با توجه به عوارض مرتبط با دوز بالاي ATO، درمان تركيبي يك روش معقول براي افزايش اثر بخشي ATO مي‌باشد. از اين رو در اين مطالعه از سيم واستاتين(SV)، داروي كاهنده كلسترول، استفاده و فرض نموديم كه SV به همراه ATO ممكن است سبب تقويت اثرات ATO در دوزهاي پايين‌تر شود. مواد و روش‌ها در يك مطالعه تجربي، اثر سايتوتوكسيك ATO و SV (به تنهايي و تركيبي) بر اساس ميزان مهار فعاليت متابوليك در آزمايش MTT ، درصـد زنده‌ماني با رنگ تريپان بلو، آپوپتوز با فلوسايتومتري و ميزان تغييرات در رونوشت ژن‌هاي Bax و Bcl-2 به روش RQ-PCR اندازه گيري شد. از آزمون آماري Student’s t-test و one-way ANOVA و نرم‌افزار 21SPSS براي تجزيه آماري اطلاعات استفاده شد. يافته‌ها ATO و SV هر يك به طور وابسته به دوز باعث كاهش فعاليت متابوليك سلول‌هاي NB-4 مي‌شوند. علاوه برآن، تيمار تركيبي سبب كاهش زنده‌ماني و افزايش جمعيت سلول‌هاي آپوپتوتيك و هم چنين افزايش نسبت Bax/Bcl-2 مي‌گردد. نتيجه گيري نتايج نشان مي‌دهند كه ATO و SV به شكل هم‌افزايي در القاي مرگ سلولي و مهار تكثير سلول‌هاي NB-4 با يكديگر همكاري نموده‌اند. علاوه برآن، نتايج پيشنهاد مي‌كنند كه تيمار تركيبي باعث افزايش مرگ برنامه‌ريزي شده سلولي احتمالاً از طريق تقويت مسير داخلي آپوپتوز مي‌شود. در مجموع و با توجه به داده‌هاي حاصل، SV نشان داده است كه توان كاهش دوز موثر ATO را دارد.

Abstract Background and Objectives The efficacy of arsenic trioxide (ATO), as a poisonous drug, in the treatment of acute promyelocytic leukemia (APL) is widely accepted. Due to adverse effects associated with high-dose ATO, the combination therapy is a rational therapeutic strategy to enhance the effectiveness of ATO. In this regard, we used simvastatin (SV), a cholesterol lowering medication, and hypothesized that SV plus ATO would potentiate the efficacy of ATO at lower doses. Materials and Methods To evaluate the effects of SV and ATO treatment (in isolation or in combination) on transcriptional levels of Bax and Bcl-2, apoptosis, growth kinetic, and metabolic activity of NB-4 cells, we employed RQ-PCR, flowcytometry, trypan blue dye exclusion, and MTT assays, respectively. The data were analyzed using SPSS 21, student’s t-test and one-way ANOVA tests. Results Both SV and ATO considerably hindered the metabolic activity of NB-4 cells in a concentration-dependent manner. In addition, the co-treatment with them exerted an indicative decline in viability, and a significant augmentation in apoptotic population and in the ratio of Bax to Bcl-2 mRNA level. Conclusions Our results have demonstrated that ATO and SV cooperate synergistically to induce cell death and to inhibit the proliferation rate of NB-4 cells. Furthermore, our results suggest that the combination treatment increased the programmed cell death rate probably through enhancing the intrinsic mitochondrial apoptotic pathway. On aggregate and in view of these data, SV showed the potency for attenuating the effective dose of ATO.