تعيين تيپ توكسيني كلستريديوم پرفرينجنس جدا شده از قطعات بسته بندي شده مرغ گوشتي

Toxinotyping of Clostridium perfringens strains isolated from packed chicken portions

زمينه و اهداف: باكتري كلستريديوم پرفرينجنس برمبناي توليد سموم آلفا، بتا، اپسيلون و يوتا به پنج تيپ A تا E طبقه بندي مي شود. بعضي از سويه هاي اين باكتري قادر به توليد انتروتوكسين بوده كه مي تواند باعث مسموميت غذايي در انسان شود. علاوه بر اين، توكسين هاي ديگري همچون netB و tpeL كه اخيرابه عنوان عوامل حدت كلستريديوم پرفرينجنس در بيماري هاي طيور مطرح شده اند، ممكن است در انسان نيز در تشديد علايم مسموميت غذايي موثر باشند. هدف از اين مطالعه تعيين پروفايل توكسيني كلستريديوم پرفرينجنس جداشده از نمونه ها‌ ي قطعات بسته بندي شده مرغ گوشتي با استفاده از روش هاي Single وMultiplex PCR مي باشد. مواد و روش كار: در يك مطالعه مقطعي تعداد 180 نمونه قطعه بسته بندي شده مرغ گوشتي شامل گردن، بال و كبد (هر كدام 50 نمونه) و سنگدان (30 نمونه) به طور تصادفي جمع آوري و از بابت آلودگي به كلستريديوم پرفرينجنس مورد ارزيابي قرار گرفت. بدين منظور نمونه ها برروي محيط هاي آگار حاوي 7% خون دفيبرينه گوسفند، TSNو TSC كشت گرديدند. جدايه هاي بدست آمده از بابت حضور ژن هاي مسيول توليد توكسين (آلفا، بتا، اپسيلون و يوتا) و ژن هاي حدت (tpeL و netB) به روش PCR تعيين تيپ گرديدند. يافته‌ها: در اين مطالعه از كل نمونه هاي مورد بررسي تعداد 6 جدايه به عنوان كلستريديوم پرفرينجنس مورد تاييد قرار گرفتند كه درتمامي جدايه ها (100%) ژن هاي cpa و cpb، شناسايي گرديد. با توجه به نتايج بدست آمده مشخص گرديد كه كليه جدايه ها به تيپ C كلستريديوم پرفرينجنس تعلق دارند. در5 جدايه (83.33%) ژن netB و در 3 جدايه (50%) ژن tpeL شناسايي گرديد. نتيجه‌گيري: نتايج اين مطالعه نشان مي دهد كه ممكن است تيپ هاي توكسين زاي كلستريديوم پرفرينجنس كه واجد ژن هاي عوامل حدت باكتري چون netB كه در ايجاد انتريت نكروتيك در طيورنقش دارند از طريق مرغ و فرآورده هاي طيور به انسان انتقال يابند.

Background and Aim: Clostridium perfringens are classified into five toxin types A to E, on the basis of production of Alpha, Beta, Epsilon and Iota toxins. Some strains are able to produce enterotoxin, can cause food poisoning in human. The bacteria are able to produce netB and TpeL toxins which are virulence factors in necrotic enteritis in poultry. The aim of this study was to determine the toxin profile of C. perfringens strains isolated from packed chicken portions using Single and Multiplex PCR assays. Materials and Methods: In a crossectional study, 180 sample of chicken portions including wing (n=50), liver (n=50), neck (n=50) and gizzard (n=30) were collected randomly and examined for C. perfringens contamination. For this purpose all of samples were cultured on the 7% sheep defibrinated blood agar, TSN and TSC culture media. All of the isolates were investigated for the presence of alpha, beta, epsilon, iota toxin and virulence (tpeL and netB) genes. Results: In the present study, 6 isolates out of 180 samples, were confirmed as C. perfringens by culture and molecular methods. All of the isolates (100%) were confirmed as cpa and cpb positive strains and belong to type C of C. perfringens. The netB gene was detected in 5 isolates (83.33%) and tpeL gene in three isolates (50%). Conclusions: Our findings show the majority of C. perfringens in broilers are belong to type C which produce necrotic enteritis in poultry and may be transmitted to human through poultry products.