جداسازي و شناسايي يك سويه توليدكننده ريبوفلاوين از نكتارين

Isolation and identification of a riboflavin producer yeast from Nectarine

مقدمه: بسياري ميكروارگانيسم ها همچون قارچ ها، باكتري ها و مخمرها به طور ذاتي توانايي توليد ويتامين ها از جمله ويتامين B2 يا ريبوفلاوين را دارند. در اين راستا، پژوهش حاضر با هدف جداسازي و غربال‏گري مخمرهاي توليدكننده ريبوفلاوين از منابع مختلف خاك، برگ و ميوه ها انجام شد‏‏. مواد و روش‏‏ها: نمونه هايي از برگ، خاك درختان و نيز انواع ميوه ها به منظور بررسي حضور مخمرها و توانايي توليد ريبوفلاوين توسط آن‏ها تهيه شد. پس از خالص و غني سازي نمونه ها، به منظور سنجش احتمالي توليد ريبوفلاوين از روش هاي اسپكتروفتومتر، كروماتوگرافي لايه نازك و كروماتوگرافي مايع با كارآيي بالا استفاده شد. در انتها، شناسايي جدايه برتر انتخابي با استفاده از تكنيك هاي رايج ريخت‏شناسي، بيوشيميايي و مولكولي انجام شد. نتايج: در اين تحقيق، 26جدايه مخمري از نمونه هاي محيطي جداسازي شد كه 6 جدايه توانايي توليد ريبوفلاوين را نشان دادند. نتايج شناسايي جدايه برتر انتخابي به‏وسيله ويژگي‏هاي بيوشيميايي و فنوتيپي مشخص كرد كه اين جدايه وابسته به مخمر كلاويسپورا لوسيتانيا است و با توجه به جداسازي آن از ميوه شليل، اين جدايه، كلاويسپورا لوسيتانيا جدايه N3 (شماره ثبت ژن: JQ586258) نام‏گذاري شد. بحث و نتيجه‏گيري: تنها يك جدايه از 6 جدايه توليدكننده، بررسي و شناسايي نهايي شد ولي بر رسي روي ساير جدايه هانشان داد كه23 در صدآن‏ها توان توليد را دارند. اين نتيجه مويد اين مطلب است كه كشور ايران پتانسيل لازم براي جدا سازي مخمرهاي توليد كننده ريبو فلاوين را دارد.

Introduction: Many microorganisms like fungi, bacteria and yeasts, have a natural ability to produce vitamins included vitamin B2 or riboflavin. In this regard, the present study was performed to isolation and screening for riboflavin producing yeasts from various sources of soil, leaf and fruits. Materials and methods: samples of leaf, soil and fruits were prepared for the presence of yeasts and by its ability to produce riboflavin. After purification and enrichment of samples, in order to assay riboflavin production, spectrometry, thin layer chromatography and high performance liquid chromatography were used. Finally, the best selected isolate was identified using conventional morphological, biochemical and molecular techniques. Results: In this study, 26 yeast strains were isolated from environmental samples, that 6 isolates showed the ability to produce riboflavin. Identification results of the best selected isolate by biochemical and phenotypic characteristics revealed that this isolate is related to Clavispora lusitaniae and considering isolation of it from nectarine, has named it Clavispora lusitaniae strain N3 (Gene accession no: JQ586258 ). Discussion and conclusion: Although only one of the six producing strains was studied and identified, observation of ability to produce among 23% of strains showed necessity for further investigation. And according to the result of absence of viewing report about production by investigated strain, it can be said that Iran has potentiality for isolation of yeasts and is capable of producing riboflavin. Key words: Isolation and identification, Riboflavin production, Yeast, Clavispora lusitaniae