بررسي رابطه الگوي ژنتيكي و حساسيت به داروي تربينافين در ايزوله هاي كلينيكي ترايكوفايتون روبروم

Study of Relationship between Genetic Pattern and Susceptibility to Terbinafine in Clinical Isolated of Trichophyton rubrum

زمينه و هدف: ترايكوفايتون روبروم يكي از شايعترين عوامل مولد بيماري درماتوفيتوزيس است. يكي از داروهايي كه به طور وسيعي جهت درمان تجويز مي شود، تربينافين از گروه آليل آمين ها مي باشد. اخيراً روشهاي تايپينگ مولكولي براي پاسخ دادن به سوالات اپيدميولوژيكي و مشكلات عود مجدد بيماري گسترش زيادي يافته اند. اين مطالعه روي 22 ايزوله ترايكوفايتون روبروم كه به طور اتفاقي از بيماران مبتلا جدا شده بود، انجام گرفت. هدف مطالعه بررسي رابطه الگوي ژنتيكي و حساسيت به داروي تربينافين در ايزوله هاي كلينيكي ترايكوفايتون روبروم بود. روش كار: ابتدا جنس و گونه قارچهاي جداشده از بيماران با روش هاي ماكروسكوپي و ميكروسكوپي تاييد گرديد .سپس با استفاده از محيط كشت هاي حاوي مقدار معين دارو مقاومت و حساسيت ايزوله ها نسبت به دارو تعيين شد.در مرحله بعد DNA قارچ ها استخراج گرديد و RAPD-PCR (تكثير تصادفي قطعات پلي مرفيك) با استفاده از 3 پرايمر با توالي تصادفي انجام گرفت. يافته ها: هر پرايمر الگوي تكثيريافته متفاوتي را ايجاد كرد و با هر 3 پرايمر تفاوتهايي در الگوي ژنتيكي نمونه هاي حساس و مقاوم ديده شد ولي هيچ باندي كه 100% اختصاصيت را نشان دهد يافت نشد. نتيجه گيري: 12ايزوله حساس كه در غلظت 1/0 ميكروگرم در ميلي ليتر دارو رشد نكردند،در غلظت هاي پايين تر دارو نيز رشد آن ها به ميزان چشمگيري در مقايسه با پليت شاهد محدود شد.10 ايزوله مقاوم كه در غلظت 1/0ميكروگرم در ميلي ليتر دارو رشد كردند، در غلظت هاي پايين تر دارو نيز از خود مقاومت نشان دادند. آناليز RAPD جهت تايپينگ مولكولي ايزوله هاي ترايكوفايتون روبروم كاملاً مناسب نشان داد.

Background & objectives: Trichophyton rubrum is one of the most common pathogeniccause of dermatophytosis. One of the drugs which have been prescribed widely for fungal infections is terbinafine which belongs to allylamines group of antifungal agents. Recently molecular typing methods have been developed for answering the epidemiological questions and disease recurrence problems. Current study has been conducted on 22 isolates of Trichophyton rubrum obtained from patients randomly. Our aim was the investigation of correlation between genetic pattern and sensitivity to Terbinafine in clinical isolates of Trichophyton rubrum. Methods: Firstly the genus and species of isolated fungi from patients have been confirmed by macroscopic and microscopic methods, then, the resistance and sensitivity of isolates against drug have been determined using culture medium containing defined amount of drug. In next step fungal DNA has been extracted by RAPD-PCR (random amplified polymorphic DNA) with random sequences of 3 primers. Results: Each primer produced different amplified pattern, and using each 3 primers differences have been observed in genetic pattern of resistant and sensitive samples using each 3 primers, but there was no bond with 100% specificity. Conclusion: The 12 sensitive isolates which didn’t grow in 0.1 mg concentration of drug, also had limited growth at the low concentration of drug. Ten resistant isolates which grew in 0.1mg/ml of drug, in lower concentration of drug were resisted. RAPD analysis for molecular typing of Trichophyton rubrum seems to be completely suitable.