تمايز سلول هاي بنيادي مشتق از بافت چربي به سلول هاي بنيادي/پيش ساز عصبي با استفاده از روش كشت نوروسفر

Transdifferentiation of Adipose Derived Stem Cells into Neural Stem/Progenitor Cells by Neurosphere Cultivation Assay

مقدمه: سلول‌های بنيادی مشتق از بافت چربی قادرند به سلول های عصبی و گليالی تمايز يابند. يكی از روش هايی كه به واسطه آن می توان تعداد قابل توجهی سلول بنيادی/پيش ساز عصبی از تمايز سلول های بنيادی مشتق از بافت چربی به دست آورد روش كشت نوروسفر می باشد. در اين فرايند سلول های بنيادی مشتق از بافت چربی تحت شرايط مناسب تكثير يافته و تجمعات سلولی تمايز نيافته چند توانی به نام نوروسفر را ايجاد می كنند كه قادرند به سلول های بنيادی/پيش ساز عصبی تبديل شوند. مواد و روش‌ها: در اين تحقيق سلول‌های بنيادی از بافت چربی ناحيه ی كشاله ی ران و پشت كليه ی موش صحرايی جدا و پس از كشت با استفاده از روش تمايزی غير مستقيم (كشت نوروسفر) به سلول‌های بنيادی/پيش ساز عصبی تمايز داده شدند. سلول‌های بنيادی مشتق از بافت چربی، نوروسفر و سلول‌های بنيادی/پيش ساز عصبی با روش ايمونوسيتوشيمی و RT-PCR ارزيابی شدند. يافته‌ها: سلول‌های بنيادی مشتق از بافت چربی نشان‌گرهای CD90، CD29، CD49d ،CD44 ، CD105و CD99 را بيان كردند اما قادر به بيان نشان‌گرهای CD106 و CD31 نبودند. به علاوه ژن‌های Nanog ، Oct4 و Sox2 در اين سلول‌ها بيان شد. نوروسفر و سلول‌های بنيادی/پيش ساز عصبی نشان‌گرهای Nestin، NF-68 و NF-200 و ژن‌های Nanog، Sox2، NeuroD1، Oct4، Musashi1و Nestin را بيان كردند. ژن MBP در اين سلول‌ها بيان نشد. نتيجه‌گيری: به نظر می‌رسد روش تمايز غير مستقيم جهت تمايز سلول های بنيادی مشتق از بافت چربی به سلول های بنيادی/پيش ساز عصبی مؤثر باشد.

Introduction: Adipose derived stem cells (ADSCs) have the potency to differentiate into the neuron and glial cells. One of the ways to make a large number of neural stem/progenitor cells (NS/PCs) from ADSCs is the usage of neurosphere cultivation. In this procedure, ADSCs proliferate under certain conditions continuously and make multipotent undifferentiated colonies named neurosphere that can differentiate to NS/PCs. Materials and Methods: in the current study, adipose stem cells isolated from rat inguinal and pararenal regions. Then these cells differentiated to the NS/PCs using indirect differentiation method (neurosphere culture). Adipose derived stem cells, neurosphere and NS/PCs were evaluated using immunocytochemistry and RT-PCR techniques. Results: the results indicated ADSCs were immunoreactive to CD90, CD29, CD49d, CD44, CD105 and CD99 without any immunoreactivity for CD106 and CD31. In addition, these cells expressed the genes of Nanog, Oct4 and Sox2. Both of Neurosphere and NS/PCs were immunoreactive to Nestin, NF-68 and NF-200 and also were able to express Nanog, Sox2, NeuroD1, Oct4, Musashi1 and Nestin genes. However, these cells were unable to express MBP gene. Conclusion: It seems that indirect differentiation is effective for differentiate ADSCs into NS/PCs.