بررسي اثر عصاره بيضه در مقايسه با عوامل رشد اختصاصي بر روي حفظ خود نوزايي سلول‌هاي بنيادي اسپرماتوگوني

The Evaluation of Testes Extracts on Spermatogonial Stem Cells’ Self-Renewal Property Compared to Their Specific Growth Factors

مقدمه: سلول‌هاي بنيادي اسپرماتوگوني به‌عنوان سلول بنيادي اختصاصي بافت بيضه وظيفه توليد مداوم اسپرم را در جنس نر بر عهده دارند. حفظ خودنوزايي اين سلول‌ها جهت تضمين اسپرم‌زايي مداوم ضروري بوده و كنام بيضه با فراهم‌آوردن شرايط مناسب اين مهم را برعهده دارد. تا‌كنون در شرايط آزمايشگاهي مواد و عوامل رشد اختصاصي جهت جايگزيني اين كنام معرفي شده‌اند كه اغلب اين مطالعات بر روي سلول‌هاي بنيادي اسپرماتوگوني پستانداران صورت گرفته است. لذا در اين مطالعه اثر عصاره بيضه موش و خروس بالغ در مقايسه با عوامل رشد بر روي ويژگي كلني‌زايي سلول‌هاي بنيادي اسپرماتوگوني خروس مورد بررسي قرار گرفت. مواد و روش‌ها در اين مطالعه اثر عصاره بيضه موش و خروس بالغ در مقايسه با سه عامل رشد GDNF، bFGF و LIF بر روي ويژگي كلني‌زايي سلول‌هاي بنيادي اسپرماتوگوني خروس در طي چهار روز تيمار تحت بررسي قرار گرفت. پس از مشخص شدن غلظت بهينه عوامل مورد آزمايش، سلول‌ها به‌مدت دوهفته تحت تيمار قرار گرفتند و سپس بررسي بيان ژن OCT4 به‌عنوان يك ژن حايز اهميت در سلول‌هاي بنيادي اسپرماتوگوني با روش Real-time RT-PCR انجام پذيرفت. نتايج: نتايج بررسي كلني‌زايي نشان داد كه پس از گذشت چهار روز از تيمار با عصاره بيضه موش و خروس بالغ در مقايسه با گروه كنترل و همچنين عوامل رشد GDNF، bFGF و LIF در مقايسه با نمونه‌هاي كنترل تفاوت قابل ملاحظه‌اي را در تعداد كلني‌هاي تشكيل شده نشان دادند. نتايج بررسي بيان ژني نيز نشان داد كه پس از گذشت دو هفته از تيمار، بيان ژن OCT4 به‌طور معني‌داري افزايش مي‌يابد. نتيجه‌گيري: نتايج اين مطالعه نشان داد عصاره بيضه مي‌تواند به‌عنوان جايگزيني مناسب اما قابل ارتقا براي عوامل رشد گران قيمت مطرح گردد.

Introduction: Spermatogonial stem cells are regarded as the continual generator of sperms in males. They possess the potential to regenerate themselves, provided by the niche, which is necessary for substituting the old sperms with the new ones and their population’s maintenance. There are demanding efforts conducted often on spermatogonial stem cells, and some special growth factors with the capability of reestablishment of this niche under experimental circumstances, but there have been few studies on poultries in this respect. Methods: In the present study, the impact of adult mice and roosters testes extracts on colony-formation potential of chicken spermatogonial stem cells in the course of four days, as compared to those of three conventional growth factors (LIF, bFGF and GDNF) was investigated. After determination of the optimum concentrations of growth factors, OCT4 gene expression was measured as one of spermatogonial stem cell activities’ signature via Real-time RT-PCR technique during two weeks treatment. Results: The results of colony forming activity show that in vitro treatment by the mice and roosters testes extracts and the three mentioned growth factors (GDNF,bFGF and LIF) had a considerably discrepancies in terms of the number of created colonies compared to the control group (without adding any factor) after four days. Moreover, the OCT4 over-expressed extremely by these biological impulses after two weeks. Conclusion: The results indicated that the testes extract would be a valuable substitute for non-economical industrial growth factors.