اثر transforming growth factor alpha بر سلول‌هاي عصبي بنيادي شكنج دندانه‌اي و سلول‌هاي پيراميدال ناحيه CA1 هيپوكامپ در موش صحرايي به دنبال ايسكمي - ريپرفيوژن

Effect of transforming growth factor alpha of dentyte jyrus neurons and pyramidal cells of CA1 subfiled of hippocampus following ischemia-reperfusion in Rats

زمينه و هدف : در ايسكمي مغزي، كاهش ميزان متابوليت‌هاي مغزي در اثر كاهش جريان خون به كاهش ذخيره اكسيژن و در نتيجه مرگ بافت مغزي يا سكته مغزي منجر مي‌شود. اين مطالعه به منظور تعيين اثر TGF-? (transforming growth factor alpha) بر سلول‌هاي عصبي بنيادي شكنج دندانه‌اي و سلول‌هاي پيراميدال ناحيه CA1 هيپوكامپ براساس مطالعات ايمونوهيستوشيمي و رفتاري در مدل تجربي ايسكمي – ريپرفيوژن مغزي در موش صحرايي نر انجام شد. روش بررسي : اين مطالعه تجربي روي 42 سر موش صحرايي نر نژاد ويستار با وزن 300-250 گرم در دانشكده پزشكي دانشگاه علوم پزشكي تهران انجام شد. موش‌ها به‌صورت تصادفي در گروه‌هاي كنترل (تعداد:7)، شم (تعداد:7)، ايسكمي (تعداد:14) و درمان (تعداد:14) قرار گرفتند. براي گروه كنترل مداخله‌اي صورت نگرفت. گروه شم فقط تحت استرس جراحي قرار گرفت. گروه ايسكمي (n=14) به دو زيرگروه تقسيم شد. 7 سر موش تحت القا ايسكمي با انسداد شريان‌هاي كاروتيد مشترك به‌مدت 30 دقيقه قرار گرفتند و 7روز بعد به روش استريوتاكسي 5 ميكروليتر PBS (phoshate buffer salin) به داخل بطن راست تزريق شد و در روز 12 ازنظر بيان Nestin بررسي شدند. 7 سر موش باقيمانده پس از القا ايسكمي و دريافت PBS دوماه بعد از نظر حافظه فضايي بررسي شدند. گروه درمان (n=14) به دو زيرگروه تقسيم شد. 7 سر موش تحت القا ايسكمي قرار گرفتند و 7روز بعد 50 نانوگرم TGF-? حل شده در 5ميكروگرم PBS به روش استريوتاكسي به داخل بطن راست تزريق شد. سپس در روز دوازدهم از نظر بيان Nestin بررسي شدند. 7 سر موش باقيمانده پس از القا ايسكمي و دريافت TGF-? دوماه بعد از نظر حافظه فضايي بررسي شدند. سپس از هر گروه نيمي از موش‌ها (5 سر) در روز 12 و نيمي ديگر (5 سر) در روز 72 بعد از فيكساسيون با روش پرفيوژن داخل قلبي از نظر بافتي با روش ايمونوهيستوشيمي و رنگ‌آميزي نيسل بررسي شدند. براي بررسي حافظه فضايي از روش morris water maze استفاده شد. داده‌ها با استفاده از نرم‌افزار آماري SPSS-16 و آزمون ANOVA تجزيه و تحليل شدند. يافته‌ها : تجويز TGF-? به‌دنبال ايسكمي - ريپرفيوژن موجب افزايش بيان سلول‌هاي عصبي در شكنج دندانه‌اي شد و اختلاف معني‌داري در تعداد نورون‌هاي پيراميدال ناحيه CA1 هيپوكامپ موش‌ها در گروه‌هاي ايسكمي و درمان مشاهده گرديد (05/0P < ). همچنين در آزمون ماز آبي اختلاف معني‌داري در شاخص حافظه فضايي در دو گروه ايسكمي و درمان مشاهده شد (05/0P < ). نتيجه‌گيري : اين مطالعه نشان داد كه استفاده از TGF-? باعث كاهش آسيب‌هاي ناشي از ايسكمي ريپرفيوژن به صورت افزايش تعداد نورون‌هاي پيراميدال، بيان Nestin و بهبود حافظه مي‌گردد.

Background and Objective: Ischemia-reperfusion invoke cell death in hippocampus. This study was carried out to investigate the effect of transforming growth factor alpha (TGF-alpha) of dentyte jyrus neurons and pyramidal cells of CA1 subfiled of hippocampus following ischemia-reperfusion in rat models. Materials and Methods: This experimental study was done on 40 male Wistar rats weighing 250-300gr. Animals were divided in four groups: control (n=7), sham (n=7), ischemia (n=14) and treatment (n=14). Sham group was just under surgical stress. In ischemia and treatment groups after induction of ischemia-reperfiusion by obstruction of carotid arteries blocked for 30 minutes, reperfusion PBS (phosphate buffer salin) and subsequently TGF-alpha (50 ng) were injected stereotaxicaly in lateral ventricle, respectively. In 12 and 72 days after treatment the brains were fixated by transcardial perfusion and stained by immunohistochemestry and nissle methods. Furthermore, morris water maze was used to evaluate the learning memory. Data were analyzed using SPSS-16 and ANOVA test. Results: Injection of TGF-alpha increased the cell number in hippocampus of treatment group compared to ischemic group. TGF-alpha increased expression of neuron in dentyte jyrus of treatment group in comparison with ischemic group (P < 0.05). Also spatial memory improved in treatment group in comparison with ischemia group. Conclusion: TGF-alpha improves ischemia-induced neurodegenration and memory impairment.