ساخت داربست نانوفيبر هيبريدي PCL/PLGA با قابليت رهايش كنترل‌شده انسولين به منظور كاربرد آن در مهندسي بافت غضروف

Preparing PCL/PLGA Hybrid Nanofiber Scaffold Capable of Controlled Releasing of Insulin for Cartilage Tissue Engineering Application

مقدمه: پلي‌لاكتيك كوگلايكوليك اسيد (PLGA) و پلي كاپرولاكتون (PCL) از پليمرهايي مي‌باشند كه در زمينه رهايش دارو و ساخت داربست‌هاي مهندسي بافت مورد توجه قرار گرفته‌اند. هدف از اين مطالعه ساخت داربست نانوفيبر هيبريدي PCL/PLGA است كه بتواند علاوه بر ايجاد بستري مناسب براي اتصال و رشد سلول‌ها به عنوان حاملي براي رهايش كنترل شده انسولين در دوره زماني معين عمل كند. روش بررسي: سلول‌هاي كندروسيت از بافت غضروف تيغه بيني با استفاده از آنزيم كلاژناز جداسازي و به صورت تك لايه كشت داده شد، سپس سلول‌هاي پاساژ سوم بر روي داربست‌ها كاشته شدند. ميزان رهايش انسولين از داربست نانوفيبر هيبريدي PCL/PLGA در طي 22 روز به وسيله تست راديوايمني (RIMA) به دست آمد. چسبندگي، پراكندگي و مورفولوژي سلول‌ها به وسيله رنگ‌آميزي بافتي H&E و رنگ آميزي آلشيان بلو بررسي شد. نتايج: داربست نانوفيبر هيبريدي PCL/PLGA داراي رهايش آهسته و مداوم انسولين در طي سه هفته مي‌باشد. كندروسيت‌ها به طور يكنواخت در سراسر داربست پراكنده شده‌اند به خوبي به درون حفرات داربست فرورفته اند و مورفولوژي گرد خود را حفظ كرده‌اند. نتيجه‌گيري:. بنابراين داربست نانوفيبر هيبريدي PCL/PLGA بستر مناسبي را براي رشد كندروسيت‌ها به منظور تشكيل بافت مهندسي شده غضروفي فراهم مي‌كند.

Introduction: Poly lactic co- glycolic acid (PLGA) and poly caprolacton (PCL) are highly applicable polymers in the field of drug delivery and tissue engineering scaffolds. Therefore, this study aimed to design an insulin-loaded PCL/PLGA hybrid nanofiber scaffold in order to be applied in attachment and growth of chondrocytes. Moreover, it can provide a vehicle for the controlled release of active insulin in a certain time period. Methods: Chondrocyte cells were isolated from septum cartilage tissue utilizing collagenase and were also cultured in monolayer, then the third-passage cells were seeded on the scaffolds. Insulin release from the PCL/PLGA hybrid nanofiber scaffold was examined by Radio Immuno Metric Assay (RIMA) during 22 days. Adherence, distribution and morphology of cells were observed by H&E and alcian blue staining. Results: PCL/PLGA hybrid nanofiber scaffold revealed a slow and sustain release of insulin within three weeks. Chondrocytes were distributed evenly throughout the scaffolds. In addition, they sank into the pores of scaffold and maintained their rounded morphology. Conclusion: Biological activity of insulin has been maintained during 22 days of controlled release from hybrid nanofiber PCL/PLGA scaffold. Chondrocytes were distributed evenly throughout the scaffold and revealed a rounded morphology. Therefore, this scaffold provides a suitable carrier for chondrocyte growth as well as formation of tissue engineered cartilage.