تاثير عصاره تخليص شده پلاكت‌هاي خون بر روي رشد و بقا اووسيت و فوليكول پره‌آنترال موش سوري نژاد NMRI

The Effect of Platelet Layset on Growth and Survival of Oocytes and

مقدمه: عناصر موجود در محيط كشت مي‌تواند تاثير فزآينده‌اي در رشد و تكوين فوليكول و اووسيت در محيط آزمايشگاهي داشته باشد. در مطالعه حاضر اثر عصاره پلاكت‌هاي خون روي رشد و بقاي فوليكول و اووسيت در محيط آزمايشگاهي بررسي شده است. روش بررسي: فوليكول‌هاي پره‌آنترال موش سوري نابالغ نژاد NMRI با ابعاد 100 تا 130 ميكرومتر تهيه گرديد. فوليكول‌ها براي مدت 12 روز در محيط‌هاي متفاوت كشت داده شدند. محيط‌ها حاوي 5 و 10 درصد عصاره پلاكت‌هاي خون (PL) به عنوان محيط مورد آزمايش و دو محيط ديگر حاوي 5 و 10 درصد سرم گاوي (FBS) به عنوان محيط كنترل بودند. محيط كشت هر يك روز در ميان تعويض گرديد. در نهايت درصد بقا و رشد فوليكول توسط ميكروسكوپ اينورت يك روز بعد از كشت و در پايان كشت بررسي گرديد. نتايج: بعد از 12 روز كشت اووسيت‌ها رشد معني‌داري در محيط‌هاي داراي عصاره پلاكت‌هاي خون((PL نشان دادند و توانستند به اندازه اووسيت‌هاي بالغ در محيط كنترل برسند. تعداد فوليكول‌ها بعد از يك روز در محيط حاوي 10% FBS و محيط‌هاي آزمايشي نسبت به 5%FBS كاهشي معني‌دار داشتند (05/0p < ). اما در پايان دوره 12 روزه كشت بيشترين بقا متعلق به محيط آزمايشي حاوي 5% PL بود و تعداد فوليكول در ديگر گروه‌ها كاهشي معني‌دار نسبت به اين گروه آزمايشي نشان دادند (05/0p?). نتيجه‌گيري: عصاره پلاكت‌هاي خون باعث بهبود محيط كشت فوليكول شده و در رشد اووسيت و ميزان بقا فوليكول‌ها موثر مي‌باشد. به نظر مي‌رسد PL مي‌تواند به عنوان مكمل يا يك جايگزين مناسب براي سرم‌هاي معمول از جمله FBS باشد.

Introduction: Elements present in the culture medium play important roles in cell culturing and vitro follicle culture. In recent years, a great deal of research has been focused to improve the culture medium. In this study, the effect of platelet layset extraction was investigated on growth and survival of oocyte and follicle . Methods: Pre-antral follicles of prepubertal NMRI mouse were prepared with diameter of 100-130µm and cultured for 12 days in different culture mediums. Culture mediums in experimental groups were enriched by 5 and 10% PL, whereas those of two control groups were prepared by 5 and 10% FBS. Each culture medium was refreshed every other day. Eventually, survival rate and growth of follicles were evaluated by inverted microscope after one day and at the end of culturing. Results: Oocytes in medium with PL had significant growth and reached to size of mature oocytes in medium with FBS (p?0.05). Oocytes diameter reached to 80.62±3.59 and 80.31±4.26 µm after 12 days in medium with 5 and 10%PL compared to those of oocytes in 5 and 10% FBS which were measured as 82.18± 2.56 and 82.12±2.58 µm respectively. The number of follicles had significant decrease in medium with10% FBS and experimental groups (5&10%PL) compared to 5% FBS (p?0.05). After 12 days, best survival rate belonged to 5%PL and the number of follicles declined significantly in control groups and 10%PL (p?0.05). Discussion: platelet layset improved, oocyte growth and follicle survival and culture medium of follicle. Therefore, PL can be considered as an appropriate replacement for common serums such as FBS in the future.