القاي سلول‌هاي دندريتيك تولروژن موشي با تنظيم كاهشي ملكول كمك تحريكي CD40 با استفاده از وكتور لنتي ويروس

Induction of Tolerogenic Murine Dendritic Cells by Downregulating the Co-stimulatory Molecule of CD40 Using Lentivirus Vector

زمينه و هدف: نقش مهم ملكول‌هاي كمك تحريكي در پاسخ‌هاي ايمنولوژيك به روشني مشخص شده است. با گسترش روش‌هاي نوين در ايمني شناسي ملكولي، ممانعت از سيگنا‌ل‌هاي كمك تحريكي براي القاي تولرانس به‌عنوان يكي از استراتژي‌هاي جديد در آمده است. RNA مداخله‌گر ‌‌‌‌‌‌‌(RNA Interference) يكي از روش‌هاي جديد است كه مي‌تواند به‌صورت اختصاصي و موثر بيان ژن هدف را كاهش دهد. روش بررسي: در اين مطالعه ما با استفاده از سيستم لنتي ويرال بيان ژن CD40 سلو‌‌ل‌هاي دندريتيك را مورد هدف قرار داديم. توالي Short Hairpin RNA قادر است بيان ژن CD40 را در سلول‌هاي دندريتيك موشي كاهش دهد. يافته‌ها: نتايج به‌دست آمده مويد آنست كه بيان mRNA ژن CD40 در گروه دريافت كننده‌ي لنتي ويرال shRNACD40 64 برابر و بيان پروتيين CD40 در سطح سلول‌هاي دندريتيك نيز 31 درصد كاهش پيدا كرده (P < 0/0001) و سلول دندريتيك نيز در مواجهه با سلول‌هاي T قادر به تحريك آن‌ها نمي‌باشد. بحث: اين مطالعه نشان مي‌دهد كاهش بيان ملكول CD40 موجب به‌وجود آمدن سلول‌هاي دندريتيك تولروژن و جلوگيري از پاسخ ايمنولوژيك Th1 مي‌شود. جلوگيري از پاسخ Th1 موجب سوق دادن پاسخ‌هاي ايمنولوژيك به Th2 خواهد گرديد، كه اين نوع پاسخ‌ها مي‌تواند در بيماري‌هاي خودايمني از جمله آرتريت روماتوييد و ديابت نوع يك موثر واقع گردد. واژگان كليدي: ژن CD40، لنتي وكتور، سلول‌هاي دندريتيك موش

Background and Objective: The important role of co-stimulatory molecules in immunological responses has been clearly demonstrated. With the development of new methods in molecular immunology, preventing the co-stimulatory signals in order to induce tolerance has emerged as a novel strategy. RNA interference is a new method that can specifically and effectively reduce target gene expression. Materials and Methods: In this study, we used a lentiviral system to target the expression of CD40 gene in dendritic cells. ShRNA sequence is able to reduce the expression of CD40 gene on murine dendritic cells. Results: Our results indicate 64-fold decreased expression of CD40 mRNA in the group receiving lentiviral shRNACD40 as well as 31% decrease in expression of CD40 protein on the surface of dentridic cells (p < 0.0001). Also, dendritic cells cannot stimulate T cells upon contact with them. Conclusion: This study indicates that a decrease in expression of CD40 molecule induces tolerogenic dendritic cells and prevents Th1 immunological response. Prevention of Th1 response would shift the immunological responses to Th2 response, and this type of response can be effective in autoimmune diseases including rheumatoid arthritis and type I diabetes. Keywords: CD40 Gene, Lentiviral vector, Murine Dendritic Cells