انتقال ژن Enhanced green florescent protein به كلوني اسپرماتوگوني گوساله با استفاده از Turbofect

Transfection Enhanced Green Florescent Protein to bovine spermatogonial colony through Turbofect

در بالغين، سلول‌هاي بنيادي اسپرماتوگوني(SSCs) تنها سلول‌هاي بنيادي هستند كه قادر به انتقال اطلاعات ژنتيكي به نسل بعد مي‌باشند. با در نظر گرفتن اين كه يك SSC منفرد مي‌تواند به تعداد زيادي از اسپرماتوزوآ تبديل شود، دستكاري ژنتيكي اين سلول‌ها، يك تكنولوژي نوين با كاربردهاي عملي در گونه‌هاي مختلف حيواني را مهيا مي‌سازد. در اين مطالعه ارزيابي انتقال ژن Enhanced Green Fluorescent Protein(EGFP) به كلوني‌هاي اسپرماتوگوني گاوي از طريق نوعي حامل پلي مري به نام Turbofect و تعيين بهترين روز انكوباسيون در جذب ژن توسط كلوني‌هاي اسپرماتوگوني بررسي شد. كارايي انتقال ژن خارجي EGFP به SSCs از طريق حامل Turbofect در سه روز از شروع كشت كلوني‌هاي اسپرماتوگوني (روز8 و 6، 4) توسط ميكروسكوپ فلورسنت ارزيابي شد. رنگ‌آميزي ايمنوسيتوفلورسنت عليه ماركرهاي OCT4 و Vimentin، ماهيت SSCs و سلول‌هاي سرتولي را تاييد كرد. نتايج نشان داد كه كلوني‌هاي ترانسفكت شده از طريق Turbofect در هر سه روز انجام ترانسفكشن در مقايسه با گروه‌هاي شاهد به طور معني داري افزايش يافت (05/0 > (P. كلوني‌هاي ترانسفكت شده با Turbofect در مقايسه با گروه‌هايي كه تنها حاوي ژن خارجي بدون حامل بودند نيز بالاتر بود (معني‌دار). بيشترين ميزان كلوني‌هاي ترانسفكت شده زماني بدست آمد كه ترانسفكشن در روز 4 كشت انجام شد. نتايج بدست آمده از اين مطالعه پيشنهاد مي‌كند كه Turbofect مي‌تواند به منظور انتقال مستقيم DNA خارجي به كلوني اسپرماتوگوني به ويژه در روز 4 كشت به صورت ايمن به كار رود.