جداسازي و شناسايي سويه توليد كننده بيوسورفكتانت از جنس آسينتوباكتر و بررسي اثرات ضد باكتريايي بيوسورفكتانت توليد شده از آن بر روي برخي از باكتري هاي گرم مثبت و منفي در محيط آزمايشگاه

Isolation and identification of biosurfactant-producing strains from the genus Acinetobacter spp and antibacterial effects of biosurfactant produced on some of the negative and gram-positive bacteria

سابقه و هدف: بيوسورفكتانت ها تركيبات زيستي آمفي فيليك خارج سلولي يا بخشي از غشا هاي سلولي توليد شده بوسيله انواع ميكروارگانيسم ها هستند. هدف از اين پژوهش شناسايي يك سويه باكتري از جنس آسينتوباكتر توليد كننده بيوسورفكتانت بود. مواد و روش: در اين پژوهش نمونه هاي مختلف از نفت، آب و خاك آلوده به نفت تهيه شدند. فعاليت هموليتيك، فعاليت امولسيفيه كنندگي و اندازه گيري كشش سطحي مورد استفاده قرار گرفتند و سويه انتخابي بوسيله تست هاي بيوشيميايي شناسايي شدند. همچنين ماهيت بيوسورفكتانت و اثرات ضد باكتريايي نيز براي سويه انتخابي بررسي شد. يافته ها: در اين پژوهش 88 سويه باكتريايي جداسازي شدند. از ميان آنها24 سويه داراي فعاليت هموليتيك بودند كه از ميان آنها 12 سويه فعاليت امولسيفيه كنندگي بالاي70 درصد داشتند و در نهايت از ميان آنها4سويه قادر به رساندن كشش سطحي به كمتر از mN/m40 بودند. براساس تست هاي بيوشيميايي، يك سويه انتخابي در اين پژوهش به عنوان آسينتوباكتر 88 شناسايي و انتخاب شد. نتايج بررسي ماهيت بيوسورفكتانت با كروماتوگرافي لايه نازك مشخص گرديد، از نوع گليكوليپيدي بود. همچنين بيوسورفكتانت توليدي سويه انتخابي داراي فعاليت ضد باكتريايي بر عليه شش باكتري عفونت زا بودند. حساس ترين باكتري نسبت به تاثير عصاره بيوسورفكتانت آسينتوباكتر لوفي 88، استافيلوكوكوس اوريوس و مقاوم ترين باكتري نسبت به اين عصاره؛ پروتيوس ميرابيليس مي باشد. نتايج MIC , MBC نشان داد كه MIC عصاره در رقت 63 و MBC عصاره در رقت 125 ميلي گرم بر ميلي ليتر بر روي باكتري استافيلوكوكوس اوريوس و استافيلوكوكوس اپيدرميس و سودوموناس آيروزينوزا بيشترين اثرداشت. نتيجه گيري: با توجه به نتايج اين تحقيق مي توان گفت كه اين باكتري داراي پتانسيل فراواني براي كاربرد هاي بيوتكنولوژي و زيست محيطي مي باشند.

Background and purpose: Biosurfactants are amphiphilic biological compounds produced extracellularly or as part of the cell membranes by a variety of microorganisms. The aim of this study was to identify a strain of bacteria of the genus Acinetobacter.spp biosurfactant producers. Materials and Methods: In this study, different samples of oil, water and soil contaminated with oil were prepared. Hemolytic activity, emulsification activity and measurement of surface tension were used and selected strains were identified by biochemical tests. The nature and effect of bacterial biosurfactant was evaluated for strain selection. Results: In this study, eighty eight bacterial strains were isolated. Twenty four strains have been isolated from the isolated strains with hemolytic activity, among which 12 strains with high emulsification activity of 70% were separated. Finally, 4 strains were able to reach the surface tension to less than 40mN/m. On the basis of biochemical tests, a strain selected for this study were identified as Acinetobacter ssp The nature of the biosurfactants were determined by TLC, kind of the glycolipid. Furthermore, the produced biosurfactant of the selected strain had antibacterial activity against six infectious bacteria. The most sensitive ones to the effects of bacterial biosurfactant extract of Acinetobacter ssp, were Staphylococcus aureus and the most resistant bacteria to extract were Proteus mirabilis, the results of MIC, MBC showed that Extract dilution MIC at 63 and MBC Extract in concentration of 125 mg/ ml on Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus aureus and Pseudomonas aeruginosa were the most effective. The findings indicated that the bacterial strains with over 70% of emulsification and the surface tension below 40 mN/m, are able to produce biosurfactant and oil degradation having stronger antibacterial effects. Conclusions: According to these results it can be said that this bacterium has a great potential for applications in biotechnology and environmental requirements.