تاثير فاكتور رشد شبه انسوليني بر ميزان بلوغ آزمايشگاهي تخمك ژرمينال وزيكول موش سوري

Influence of Insulin-like Growth Factor 1 on Nuclear Maturation of Germinal Vesicle Mouse Oocytes.

زمينه و هدف: بلوغ و لقاح تخمك در محيط آزمايشگاه نقش مهمي در بيولوژي توليد مثل دارد. هدف اين مطالعه بررسي اثر فاكتور رشد شبه انسوليني بر روي بلوغ، لقاح و تكامل جنين به مرحله دو سلولي در محيط كشت TCM199 بود. روش بررسي: در اين مطالعه تجربي از موش‌هاي نژاد NMRI نابالغ 4 هفته‌اي استفاده شد. براي تحريك تخمدان‌ها از 5/7 واحدPMSG استفاده شد. سپس تخمك‌هايGV با و بدون سلول كومولوس از تخمدان موش‌ها جدا شده و به محيط كشت TCM199 حاوي 100 نانوگرم بر ميلي‌ليتر فاكتور رشد شبه انسوليني منتقل شدند. پس از 24 ساعت تخمك‌ها به متافاز II رسيده و سپس تخمك‌هاي بالغ شده در محيط T6 با اسپرم لقاح داده شدند و تكامل جنيني تا مرحله دوسلولي در زير ميكروسكوپ معكوس بررسي شدند. داده‌ها با آزمون آماري مجذور كاي تجزيه و تحليل شدند. يافته‌ها: فاكتور رشد شبه انسوليني، ميزان بلوغ ولقاح تخمك‌ها و تشكيل جنين دوسلولي در گروه با سلول كومولوس نسبت به گروه بدون كومولوس در محيط TCM199 را به طور معني‌داري افزايش داد(05/0p < ). نتيجه‌گيري:نتايج نشان مي دهد افزودن فاكتور رشد شبه انسوليني به محيط كشت TCM و حفظ سلول هاي كومولوس اثر مفيدي بر ميزان بلوغ، لقاح و تكوين به مرحله دو سلو لي تخمك ژرمينال وزيكول موش دارد.

Background & aim: In vitro maturation and fertilization of oocytes play an important role in reproductive biotechnology. The aim of this study is to define the IGF-1 effect on in vitro maturation, fertilization and development of mice immature oocytes to 2-cells in TCM199 medium cultures. Methods: In this study 4 week old NMRI mice were used. Ovaries stimulation carried out using PMSG. GV oocytes with or without cumulus cells were isolated from ovaries and cultured in TCM199 in presence of 100 ng IGF-1 for 24hr.The oocytes (MII) were inseminated with sperm in T6 medium for fertilization and development of 2-cells stage and they were investigated under inverted microscope. Data analysis was performed by using Chi- 2 test. Results: In cumulus cell group and in the presence of insulin-like growth factor fertilization of oocytes, forming embryos and the formation of 2-cells compared to the group without cumulus cells significantly increased (p < 0.05). Conclusion: As the results showed oocytes with cumulus cells in the presence of insulin-like growth factor enhances maturation, fertilization and embryonic development in 2-cells oocytes compared to group without cumulus cells TCM199. Key word: Oocytes, Cumulus cell, in vitro maturation, insulin-like growth factor 1