بررسي مولكولي متيلاسيون پروموتور ژن E- كادهرين در بيماران ايراني مبتلا به سرطان روده بزرگ

Investigation of the E-cadherin Promoter Methylation in Patients with Colorectal Cancer in Iran

هدف: مطالعات نشان مي‏دهد متيلاسيون نابجاي پروموتر ژن E- كادهرين باعث خاموش شدن اين ژن و در نتيجه كاهش بيان آن مي‏شود. ارتباط كاهش ميزان بيان اين ژن در سرطان‏هاي مختلف انساني مشاهده شده است كه با مرحله هجوم تومور و متاستاز آن نيز ارتباط دارد. در اين راستا اين مطالعه با هدف بررسي رابطه بين متيلاسيون پروموتر E- كادهرين در مبتلايان سرطان روده بزرگ و خصوصيات پاتولوژيكي آن‏ها طرح‏ريزي شد. هرچند كه اطلاعات موجود در خصوص پديده اپي ژنتيك غيرفعال شدن اين ژن در سرطان روده بزرگ هنوز كافي نيست. مواد و روش‏ها: به اين منظور از 66 بيمار مبتلا به سرطان روده بزرگ كه رابطه فاميلي نداشتند، نمونه بافت توموري و نمونه سالم (مجاور تومور) تهيه شد. سپس براي حالت‏هاي متيله و غير متيله ژن E- كادهرين آغازگر اختصاصي طراحي شد و واكنش زنجيره‏اي پليمراز ويژه متيلاسيون انجام شد. بيان اين ژن در بافت‏ها نيز توسط آزمايش RT-PCRبررسي شد. نتايج با نرم‏افزار SPSS نسخه 11 و آزمون‏هاي T و Fisher Exact Test مورد تجزيه و تحليل آماري قرار گرفت. نتايج: نتايج نشان داد كه 35 تا از 66 نمونه توموري داراي متيلاسيون ژن E- كادهرين بودند (53 درصد) و در هيچ يك از نمونه‏هاي سالم (مجاور تومور) متيلاسيوني مشاهده نشد. همچنين مشاهده شد ميزان بيان اين ژن با ميزان متيلاسيون نسبت عكس دارد (05/0P < ). نتيجه‏گيري: به دليل اهميت نقش اپي‏ژنتيك در ايجاد سرطان به‏ويژه سرطان روده بزرگ كه متاسفانه در جامعه ما شيوع بالايي دارد، به نظر مي‏آيد كه مهم‏ترين كار براي انجام استراتژي‏هاي كارآمد در پيش‏بيني، تشخيص، درمان، پيگيري سرطان روده بزرگ، در دسترس بودن نشانگرهاي مولكولي مناسب مانند E- كادهرين است.

Objective: E-cadherin is widely down-regulated and tightly associated with tumor invasion and metastasis in multiple human cancer types. Recent studies have shown that aberrant methylation of the E-cadherin gene promoter contributes to its silencing. However, information regarding epigenetic inactivation of E-cadherin in colorectal cancer is insufficient. Herein, we correlate association of the methylation of the E-Cadherin promoter with pathological features of colorectal cancer as well as history and demographic data. Methods: We used methylation specific polymerase chain reaction (MSPCR) to examine methylation status of the 5’ CpG island of E-cadherin along with its expression by using RT-PCR following surgical resection of 66 unrelated patients with colorectal cancer. Results: Results showed that 35 out of 66 tumor DNA samples (53%) showed aberrant methylations. In contrast, all normal tissues were unmethylated. Conclusion: The obtained results show a similarity with the Japanese (54.5%) and Greek (55.7%) populations. The results have confirmed methylation of this gene in sporadic colorectal cancer cases (40.8%) in the Iranian population by researchers in Shiraz. These data suggest that epigenetic silencing via aberrant methylation of the E-cadherin promoter plays a critical role in the inactivation of this tumor suppressor gene in colorectal cancer.