مطالعه كشت بافت گياه گل انگشتانه (Digitalis nervosa staud & Hochst)

Tissue Cultur Studty in Foxglove Plant (Digitalis Nervosa Staud & Hochst)

در اين تحقيق تكنيك هاي مختلف كشت بافت در گياه Digitalis nervosa مورد مطالعه قرار گرفت. گياهان اين جنس از گياهان مهم دارويي مي باشند كه منبع گليكوزيدهاي قلبي مهمي چون ديگوكسين، ديژيتوكسين و انواع لاناتوزيدها مي باشد به منظور بررسي كالزايي در ريزنمونه هاي برگ، از هورمون هاي مختلف گياهي و منابع مختلف كربن استفاد گرديد. عنوان منابع اكسين از هورمون هاي 2,4-D در سه سطح (0، 1، 2 ميلي گرم بر ليتر) و NAA نيز در سه سطح (5/0، 1، 2 ميلي گرم بر ليتر) و هورمون BAP در دو سطح (5/0، 1 ميلي گرم بر ليتر) استفاده گرديد. بهترين تركيب محيط كشت از لحاظ زمان كمتر براي القاي كالوس محيط كشت MS حاوي 1 ميلي گرم بر ليتر BAP، 1 ميلي گرم بر ليتر NAA و 2 ميلي گرم بر ليتر 2,4-D بود. چهار منبع مختلف كربن شامل ساكاروز، مالتوز، فروكتوز و گالاكتوز بود. بهترين محيط كشت كالزايي براي ريزنمونه هاي برگ، محيط كشت MS محتوي قند ساكاروز به ميزان30 گرم بر ليتر با تركيب هورموني 5/0 ميلي گرم در ليتر BAP و 1 ميلي گرم بر ليتر NAA معرفي گرديد. در بين ريزنمونه هاي مختلف برگ، هيپوكوتيل، كوتيلدون و ريشه، بيشترين ميزان كالزايي را ريزنمونه كوتيلدون نشان داد. بررسي اندام زايي در كالوس هاي حاصل از ريزنمونه هاي برگ با استفاده از هورمون هاي BAP وNAA صورت گرفت. بهترين محيط باززايي محيط كشت MS حاوي 2 ميلي گرم بر ليتر BAP بود. همچنين در بررسي تعيين بهترين محيط كشت براي باززايي از دو محيط MS وB5 استفاده گرديد كه درصد بيشتر باززايي در محيط كشت MS مشاهده شد. در نهايت به منظور ريشه زايي از محيط كشت MS حاوي 1 و 5/0 ميلي گرم بر ليتر IBA (ايندول بوتريك اسيد) استفاده گرديد، كه از لحاظ آماري تفاوت معني داري بين اين دو سطح به منظور القاي ريشه وجود نداشت.

Different tissue culture techniques of Digitalis nervosa staud & Hochst were studied. In this study, different kinds of plant growth regulators and sources of carbon (sucrose, galactose, fructose and maltose) were used to investigate the callus induction by leaf explants. Growth regulators 2,4-D and NAA at three levels and BA at two levels were applied. Murashige and Skoog culture medium supplemented with sucrose, 0.5 mgl-1BA and 1 mgl-1 NAA was found to be the best treatment for callus induction from leaf explants. In comparison with other culture media callus was appeared sooner on MS medium containing 1 mgl-1 BA, 1 mgl-1 NAA and 2 mgl-1 2,4-D. The cotyledon explants were the best samples for callus induction compared with the other explants (leaf, hypocotil and root). Hormones BA and NAA were used to investigate plantlet regeneration from leaf based callus. Treatment containing 2 mgl-1 BA was the best choice to shoot regeneration from leaf explant. Murashige and Skoog culture medium acted better than B5 for regeneration. Hormone IBA was used at two levels (0.5 and 1 mgl-1) for root induction. It was determined that there is no significant difference between these two treatments.