بررسي شيوع ژنوتايپ‌هاي ويروس هرپس انساني هشت در ساركوم كاپوزي در ايران به‌وسيله روش مولكولار

The prevalence of human herpesvirus 8 genotypes in Kaposi\ʹs sarcoma in Iran by using molecular technique

زمينه و هدف : ساركوم كاپوزی ( Kaposiʹs Sarcoma , KS) در منطقه مديترانه و در بيماران مبتلا به ايدز شيوع بالايی دارد. كشور ما نزديك منطقه مديترانه بوده و شيوع HIV نيز در كشور ما رو به افزايش است. با توجه به وجود ويروس هرپس انسانی هشت (HHV-8) در تمام موارد ساركوم كاپوزی، يافتن آن به‌روش Polymerase Chain Reaction (PCR) به شناسايی موارد غيرتشخيصی كمك می‌كند. ژنوتايپ‌های اين ويروس در نژادهای مختلف شيوع خاص خود را دارد كه در جمعيت ايرانی اين بررسی انجام نشده است. روش بررسی: بيماران مبتلا به ساركوم كاپوزی را بين سال‌های 1380 تا 1390 در بيمارستان رازی تهران انتخاب كرده و با استخراج DNA ويروس HHV-8 از بلوك‌های پارافينی آن‌ها، تكثير قطعه‌ای از ژنوم اين ويروس به‌روش PCR انجام شد. در نهايت قطعه مورد‌نظر در ژنوم برای تعيين توالی فرستاده شد و ژنوتايپ تعيين گرديد . يافته‌ها: بر روی 45 نمونه با تشخيص ساركوم كاپوزی PCR انجام گرفت. نتايج PCR در 35 مورد مثبت بودند. روی نمونه‌های 28 بيمار كه نتايج مثبت قابل‌قبول برای ژنوتايپ داشتند، تعيين توالی انجام شد. 20 مورد ژنوتايپ C ، هفت مورد ژنوتايپ A و يك مورد هم منفی گزارش شد . ارتباطی بين مراحل مختلف KS با ژنوتايپ‌های HHV-8 يافت نشد. نتيجه‌گيری: از آنجا كه HHV-8 در حدود 100% ضايعات KS وجود دارد و حساسيت PCR در تشخيص اين ويروس بسيار بالاست، می‌توان با شناسايی DNA ويروس به‌وسيله PCR بر روی بلوك‌های پارافينی، تشخيص قطعی KS را در آن‌ها مورد تاييد قرار داد. هم‌چنين شيوع ژنوتايپ‌های مختلف HHV-8 در كشور ايران تعيين شد.

Background: In the Mediterranean region , Kaposiʹs sarcoma (KS) has a high prevalence especially in patients with AIDS. Iran is located close to the Mediterranean region and the HIV prevalence is increasing in our country . In some stages, Kaposiʹs sarcoma is morphologically similar to other vascular tumors. Owing to the presence of human herpesvirus 8 (HHV-8) in all cases of Kaposiʹs sarcoma , detection of virus DNA by PCR method can help in the identification of non-diagnostic cases. Moreover, the prevalence of HHV-8 genotypes is different in various regions of the world and in different races. There are limited studies performed on the HHV-8 genotypes in Iranian population. Methods: Patients with Kaposiʹs sarcoma from 2001 to 2011 who refer to Tehran Razi Hospital were enrolled in this study. HHV-8 DNA was extracted from paraffin blocks and amplification of the virus genome was performed by PCR method . Finally, the target DNA fragment was used for sequencing and genotype determination. Results: PCR was performed on 53 cases. In 8 cases with suspicious morphology, PCR was negative and they were excluded from study. Of remaining 45 cases, 35 had positive PCR results, 7 had negative results and 3 had low PCR product. Samples from 28 cases that had positive PCR results, which were acceptable for genotyping, were chosen for sequencing. Twenty cases had genotype C, 7 cases had genotype A and one case was negative. The results are consistent with other studies in our geographical area. No correlation was found between the different microscopic stages and HHV-8 Genotypes. Conclusion: Since the HHV-8 is obtained in almost 100% of KS lesions and PCR s ensitivity in detection of the virus is close to 100 %, KS diagnosis can be confirmed in suspicious cases by detection of HHV-8 DNA on paraffin blocks. Moreover the prevalence of HHV-8 genotype was determined in Iran.