مقايسه سه روش رنگ آميزي كوماسي بلو R250، كلوييدال كوماسي بلو و نقره آبي در ظاهر سازي پروتيين هاي مغز موش جدا شده توسط الكتروفورز دو بعدي

Comparison of Three Staining Methods, Coomassie Blue R250, Colloidal Coomassie Blue and Blue Silver, for Detecting Mouse Brain Proteins Separated by Two-Dimensional Electrophoresis

مقدمه: در اغلب موارد، پس از انجام الكتروفورز دو بعدي تا چند صد پروتيين روي ژل از يكديگر تفكيك مي شوند. از آن جا كه اين پروتيين ها بي رنگ هستند، لازم است به نحوي آن ها را رنگ آميزي و آشكار نمود. پس از رنگ آميزي، هر پروتيين به صورت يك لكه روي ژل ظاهر مي شود. مواد و روش ها: در اين تحقيق سه روش رنگ آميزي كوماسي ساده، كلوييدال كوماسي بلو و نقره آبي براي ظاهر سازي لكه هاي پروتييني مغز موش ماده كه توسط الكتروفورز دو بعدي جدا سازي شده اند مورد استفاده و مقايسه قرار گرفتند تا حساس ترين و مناسب ترين رنگ آميزي مورد شناسايي قرار گيرد. يافته هاي پژوهش: ژل هاي به دست آمده از الكتروفورز دو بعدي پروتيين هاي مغز موش ماده پس از مرحله تثبيت هر كدام در محلول رنگ مربوطه قرار گرفتند. سه ژل براي سه رنگ آميزي كوماسي بلو R250، كلوييدال كوماسي بلو و نقره آبي ظاهر گرديدند. پس از رنگ آميزي هر كدام(طبق پروتكول مربوطه) رنگ زدايي شده و عكس آن ها ظاهر گرديد. بحث و نتيجه گيري: نتايج نشان داد كه رنگ آميزي نقره آبي بهترين روش براي رنگ آميزي پروتيين مغز موش در ژل هاي الكتروفورز دوبعدي است.

Introduction: In most cases, after two-dime-nsional gel electrophoresis procedure about hundreds proteins are separated from each other. Because these proteins are colorless, so they need to be stained and appeared. After staining, each protein appears as a spot on the gel. Materials & Methods: In this study, three staining methods including simple coom-assie blue, colloidal coomassie blue and blue silver were used to stain mouse brain proteins and separate them using two dime-nsional electrophoresis techniques. These staining methods were compared to identify the most appropriate and sensitive ones. Findings: Before staining, the gels were fixed in fixation solution. Three gels were appeared for the three staining methods. After gel staining (according to the related protocol), they were destained and scanned by scanner. Discussion & Conclusion: Results showed blue silver staining were the most appr-opriate method for staining mouse brain proteins in two-dimensional gels.