تاثير مايع رويي لنفوسيت T در القاي بلوغ سلول‌هاي دندريتيك (DC1) و توليد سلول‌هاي موثر براي ايمونوتراپي تومور

The effects of T-cell conditioned media on the induction of dendritic cell (DC1) maturation for effective tumor immunotherapy

زمينه و هدف: از آنجا كه سلول‌های دندريتيك (DC) قادر به القای پاسخ ايمنی بر عليه تومور می‌باشند، امروزه علاقه فزاينده‌ای در به‌كارگيری اين سلول‌ها در ايمونوتراپی تومور وجود دارد. در مطالعه حاضر سلول‌های دندريتيك به‌منظور استفاده در امر تحقيقات و ايمونوتراپی تومور بررسی شدند. روش بررسی: بخشی‌از سلول‌های تك‌هسته‌ای خون محيطی كه به پلاستيك می‌چسبند در حضور GM-CSF و IL-4 به‌مدت پنج روز و سپس به مدت دو روز نيز با TNF-α, PLY-IC و مايع رويی لنفوسيت T تحريك شده با PHA، PHA-activated T cells Conditioned Medium كشت داده شد و بررسی مورفولوژيك تعيين فنوتيپ، قدرت بيگانه‌خواری سلول‌های دندريتيك ارزيابی شد. توانايی سلول‌های توليدشده در واكنش مختلط لكوسيتی آلوژن و ميزان سايتوكين‌های توليد شده مورد سنجش قرار گرفت.  يافته‌ها: سلول‌های دندرتيك توليد شده با اين روش دارای افزايش بيان مولكول‌های سطحی نظير CD80، CD83، CD86، HLA-DR بودند. اين سلول‌ها دارای توانايی فاگوسيتوز كم و قدرت تحريك بالای لنفوسيت‌های T بودند. با سنجش نسبت سايتوكين‌ها مشخص شد سلول‌های دندريتيك توليد شده از نوع DC1 می‌باشند.  نتيجه‌گيری: اين داده‌ها نشان‌دهنده القای بلوغ كارامدتر سلول‌های دندريتيكی توسط مايع رويی سلول‌های لنفوسيت T می‌باشد كه با PHA تحريك شده بودند. استفاده از اين مايع رويی به‌عنوان فاكتور بلوغ می‌تواند منجر به توليد سلول‌های دندريتيكی كارامدتر با توانايی ايمونوتراپی تومور باشد و امكان تكامل هر چه بيشتر استراتژی‌های جديد در ايمونوتراپی بيماری‌ها با استفاده از سلول‌های دندريتيك توليد شده در آزمايشگاه را فراهم كند.

Background: Nowadays, dendritic cells (DC) are used for tumor immunotherapy as they can induce immune responses against tumor cells. In this research, we comprehensively studied the maturation stimulus addition, PHA-activated T-cell (PHA- TCM) conditioned medium, autologous monocyte-conditioned medium (MCM) and TNF-α for their ability to promote uniformly mature dendritic cells that elicit T-cell responses. Methods: Plastic adherent monocytes were cultured with granulocyte-macrophage colony stimulating factor (GM-CSF) and interleukin-4 (IL-4) for five days and two days with monocyte-conditioned medium (MCM), tumor necrotizing factor-α (TNF-α) without TCM (PHA-activated T-cell conditioned medium). Phenotypic and functional analyses were carried out using anti-CD14, anti-CD80, anti-CD86, anti-CD83 monoclonal antibodies. Phagocytic activity, mixed lymphocyte reaction (MLR) and cytokine production were also evaluated. Results: The generated dendritic cells had high expression of surface molecules i.e. CD80, CD83, CD86 and HLA-DR. Moreover, the cells had low phagocytic and high T- lymphocyte stimulating activities. Measurement of the produced cytokines showed the generation of type-1 dendritic cells (DC1) in the study. Conclusion: The findings indicated that more efficient maturation of dendritic cells could be achieved by the use of PHA-activated T-lymphocyte conditioned medium in the culture medium. The aforesaid supernatant can be used as a maturation factor for the production of efficient dendritic cells with the ability to be used for tumor immunotherapy. This conditioned medium can provide new strategies and evolve into more advance tools for the generation of dendritic cells in vitro for tumor immunotherapy.