مهار رشد رده سرطاني K562 لوسمي ميلوييدي مزمن انسان با استفاده از عصاره سيتوپلاسمي لاكتوباسيلوس‌هاي جدا شده از روده ماهي كپور معمولي در شرايط آزمايشگاهي

Inhibitiory properties of cytoplasmic extract of Lactobacilli isolated from common carp intestine on human chronic myelocytic leukemia K562 cell line: an in vitro study

زمينه و هدف: لاكتوباسيلوس‌ها از نظر ژنتيكی شامل گروه متنوعی از باكتری‌های توليد كننده اسيد لاكتيك هستند كه به دليل داشتن ويژگی‌هايی مانند اثرات ضد توموری، كمك به تعادل فلور ميكروبی روده، توليد تركيبات ضد ميكروبی، تحريك سيستم ايمنی ميزبان و غيره تحت عنوان پروبيوتيك معرفی شده‌اند. هدف از مطالعه حاضر بررسی تاثير عصاره سيتوپلاسمي و ديواره سلولی لاكتوباسيلوس‌های جدا شده از روده ماهی كپور معمولی بر رده سرطانيK562  (سرطان سلول‌های ميلوييدی خون انسان) می‌باشد. روش بررسی: برای اين منظور محتويات روده 115 قطعه ماهی كپور معمولی پس از صيد از منابع آبی مختلف آذربايجان غربی از نظر وجود باكتری‌های لاكتوباسيلوس بررسی شد. پس از جداسازی، شناسايی به كمك روش‌های معمولی و مولكولی باكتري شناسی انجام و عصاره سيتوپلاسمی و ديواره سلولی آن‌ها به طور جداگانه تهيه شد. براي مطالعه تاثير عصاره‌ها بر سلول‌های سرطانی K562 از روش رنگ سنجی (MTT) 3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-Diphenyltetrazolium Bromide ‌استفاده شد. يافته‌ها: بر اساس يافته‌های اين مطالعه عصاره‌های سيتوپلاسمی لاكتوباسيلوس‌هاي جدا شده از روده ماهی كپور معمولی قادر است به طور معنی‌داری رشد سلول‌های سرطاني را مهار سازد. در اين ارتباط عصاره سيتوپلاسمی دو باكتری Lactobacillus paracasei و Lactobacillus casei در غلظت موثره µg/ml33/83 به ترتيب با 56/66 و 28/54 درصد دارای بيشترين قدرت سلول‌كشی بودند. از طرف ديگر ديواره سلولی لاكتوباسيلوس‌های فوق نتوانست رشد سلول‌های سرطاني را مهار كند. نتيجه‌گيری: بر اساس يافته‌های حاصل می‌توان نتيجه گرفت كه استفاده از عصاره سيتوپلاسمی باكتری‌های لاكتوباسيلوس جدا شده از روده كپور معمولی همانند لاكتوباسيلوس‌های با منشا انسانی دارای اثرات ضد توموري هستند.

Background: Lactobacillus species are genetically diverse groups of Lactic Acid Bacteria (LAB) that have been introduced as probiotics, because of some characteristics such as their anti-tumor properties, helping the intestinal flora balance, production of antibiotics, stimulation of host immune response, etc. The aim of this study was to investigate the effects of cytoplasmic extraction and cell wall of Lactobacillus species isolated from the intestine of common carp on human chronic myelocytic leukemia or K562 cancer cell lines.Methods: The intestinal contents of 115 common carp captured from the natural resources of West Azerbaijan province in Iran were examined for LAB. After isolation, the identification of Lactobacilli was done according to traditional and molecular bacteriological tests. Subsequently, a suspension of each bacterium was prepared and the protein content of the cytoplasm was extracted. Cell wall disintegration was done by cell lysis buffer and sonication. The effects of cytoplasmic extraction and cell wall on K562 cell line proliferation were investigated by MTT assays.Results: The cytoplasmic extraction of the isolated Lactobacilli had significant (p<0.05) anti-proliferative effects on K562 cells. The cytoplasmic extractions of Lactobacillus paracasei and Lactobacillus casei inhibited K562 cell proliferation by 66.56% and 54.28% at 83.33 μg/ml concentration, respectively.Nevertheless, the Lactobacillus cell wall could not inhibit the proliferations of K562 cells (p<0.05).Conclusion: In this study, the cytoplasmic extractions of the isolated Lactobacilli from the intestine of common carp had anti-proliferative effects on K562cell line.