مقايسه روش هاي جداسازي نوكارديا از خاك: ميله پارافيني، كشت در محيط هيوميك اسيد ويتامينB آگار و پارافين آگار

Comparison of Paraffin Bait, Humic Acid Vitamin B Agar and Paraffin Agar Methods to Isolate Nocardia from Soil

زمينه و هدف: جداسازي نوكارديا به دليل رشد سريع تر باكتري هاي هم جوار در محيط طبيعي بسيار مشكل است. بنابراين انتخاب محيط كشت اختصاصي و تركيب مناسب كه بتواند ميكروارگانيسم هاي سريع الرشد مزاحم را حذف يا كاهش دهد همواره مورد توجه محققين بوده است. در اين راستا ما به بررسي و مقايسه سه روش متداول آزمايشگاهي پرداختيم تا بهترين و مطمين ترين روش جداسازي گونه هاي نوكارديا شناخته و معرفي شود. روش بررسي: نمونه هاي خاك از مناطق مختلف تهران جمع آوري و به آزمايشگاه منتقل شد. نمونه ها پس از آماده سازي، در سه محيط كشت مايع بدون كربن حاوي ميله پارافيني، هيوميك اسيد ويتامين ب آگار و پارافين آگار تلقيح و سپس در دماي 35 درجه سانتيگراد به مدت 3تا 4 هفته گرمخانه گذاري شدند. يافته ها: از تعداد 110 نمونه خاك جمع آوري شده، 31جدايه نوكارديا (18/28%)بدست آمد كه به ترتيب 19جدايه(27/17%) توسط روش ميله پارافيني، 4 جدايه(63/3%) با روش كشت در محيط هيوميك اسيد ويتامين ب آگار و 8 جدايه(27/7%) با روش كشت در محيط پارافين آگار به دست آمد. نتيجه گيري: كارايي روش ميله پارافيني با توجه به جداسازي بيشتر، ارزاني محيط كشت و وضوح كلني هاي مشكوك به جنس نوكارديا بيشتر از روش هاي ديگر كشت مي باشد. واژه هاي كليدي: نوكارديا، خاك ،ميله پارافيني،پارافين آگار

Background and Objective: The Isolation of Nocardia species is complex and time-consuming, which is due to rapid growth of adjacent bacteria. Because of the importance of a specific medium with the ability of controlling intrusive microorganisms, this study aimed at comparing three laboratory methods to introduce the reliable isolation technique for Nocardia species. Material and Methods: The soil samples were collected from different regions of Tehran province, Iran, and carefully transferred to the laboratory. The samples were cultured in three different media including Paraffin Baiting,Humic acid vitamin B agar and Paraffin agar, and incubated for 3-4 weeks at 35 °C. Results: Of 110 soil samples, 31 Nocardia isolates (28.18%) were obtained from the media including Paraffin Baiting, (19; 17.27%), Humic acid and vitamin B agar (4; 3.63%), and Paraffin agar, (8; 7.27%). Conclusion: because of high rate of isolation, low cost and the clearance of colonies suspected nocardia, Paraffin Bait technique is more reliable and efficient compared to the other methods. Key words: Nocardia; Soil; Paraffin Baiting; Humic Acid Vitamin B