رديابي و شناسايي ويروييدهاي مركبات در برخي ارقام تجاري

Identification of Citrus Viroids in Commercial Citrus Varieties by Molecular Techniques

در اين تحقيق، آلودگي ارقام پرتقال تامسون ناول، پرتقال خوني مورو، نارنگي پيج و پوملو وبر نسبت به ويروييدهاي مركبات مورد ارزيابي قرار گرفتند. ابتدا گياهان بالنگ اتراگ (C. medica) با اينوكولوم از منشا درختان مادري ارقام مذكور از طريق پيوند پوستك آلوده شده و در شرايط كنترل شده دمايي گلخانه نگهداري گرديد. پس از آلوده سازي، استخراج RNA به روش SDS-Potassium acetate از بافت اتراگ انجام و RT-PCR با استفاده از صفر آغازگر هاي اختصاصي ويروييد هاي Hop Stunt Viroid (HSVd)،Citrus Bent Leaf Viroid (CBLVd) ، Citrus Bark Cracking Viroid (CBCVd) و Citrus Dwarfing Viroid (CDVd) انجام شد. رديابي RNA ويروييد هاي مركبات، با استفاده از سيستم الكتروفورز پي در پي در ژل پلي اكريل آميد (Sequential- PAGE) و هيبريداسيون با استفاده از كاوشگر اختصاصي ويروييد Citrus Exocortis Viroid (CEVd) با استفاده از DIG نشاندار شده انجام شد. نتايج، آلودگي دو رقم پرتقال نسبت به ويروييدهاي مورد بررسي را تاييد كرد.

In this study, the possible infection of Thomson navel, Moro blood sweet orange, Page mandarin and Webber pomelo with citrus viroids was investigated. Biological indexing was performed by grafting on Etrog citron (C. medica) and maintained in temperature-controlled greenhouse. After inoculation, RNA was extracted by SDS– potassium acetate method. Detection of citrus viroids was done Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction (RT-PCR) using specific primers of Hop Stunt Viroid (HSVd), Citrus Bent Leaf Viroid (CBLVd), Citrus Dwarfing Viroid (CDVd) and Citrus Bark Cracking Viroid (CBCVd). The results indicate Thomson navel and Moro blood sweet oranges had mix infection to all viroids in this study