مقاله كوتاه پژوهشي اولين گزارش از رديابي سرولوژيكي و مولكولي ويروس موزاييك پيسك سبز خيار (CGMMV) در استان‌هاي خراسان رضوي و شمالي

First Report of Detection on Cucumber green mottle mosaic virus (CGMMV) by Serological and Molecular Methods in Razavi and Northern Khorasan Provinces

آلودگي هاي ويروسي يكي از عوامل محدود كننده توليد كدوييان در ايران است. ويروس موزاييك پيسك سبز خيار (CGMMV) يكي از ويروس‌هاي مهم آلوده كننده كدوييان است كه سبب خسارت جدي و مهمي در مراحل اوليه رشد به اين گياهان مي شود. به‌منظور رديابي اين ويروس طي سال‌هاي 1389- 1388 تعداد 220 نمونه مشكوك به آلودگي از برگ‌هاي بوته هاي ارقام مختلف خيار، كدو، هندوانه، خربزه، طالبي، گرمك از مزارع مختلف كدوييان و گلخانه هاي خيار استان‌هاي خراسان رضوي و شمالي جمع‌آوري و تحت شرايط استاندارد به آزمايشگاه منتقل گرديد. آلودگي 47 نمونه به CGMMV با انجام آزمون DAS-ELISA به اثبات رسيد. عصاره برخي از اين نمونهها به چند گونه گياه محك مايه-زني شد و بر اساس ظهور علايم و بررسي مجدد با آزمون الايزا وجود آلودگي تاييد گرديد. RNA كل از نمونههاي الايزا مثبت با استفاده از محلول RNXTM(-Plus)استخراج شد و واكنش RT- PCR با استفاده از يك جفت آغازگر اختصاصي منطبق بر ژن كد كننده پروتيين پوششي ويروس انجام شد. پس از الكتروفورز محصول PCR بر روي ژل آگارز 7/1% باندي معادلbp 420 مشاهده گرديد. نتايج اين تحقيق اولين گزارش از وجود آلودگي به ويروس موزاييك پيسك سبز خيار در مناطق مختلف استان‌هاي خراسان رضوي و شمالي مي باشد.

Virus infections are a major limiting factor in cucurbit production in Iran. Cucumber green mottle mosaic virus (CGMMV) infects many cucurbit species in the world and causing mottle and systemic mosaic symptoms on cucurbitaceous plant leaves. During 2008-2009, from different Cucurbitaceous species fields and cucumber greenhouses in Razavi and Northern Khorasan provinces, 220 leaf samples with CGMMV-like symptoms were collected and brought to the laboratory under standard condition. The identity of virus was established by the studying host rang symptoms and serological assay. By using DAS-ELISA technique 47 samples showed infection with CGMMV. Sap of infected samples inoculated on a number of indicator plants and presence of CGMMV was confirmed by observation of specific symptoms and DAS-ELISA results. To confirm the results of ELISA test, total RNA was extracted using RNXTM(-Plus) solution and synthesis of cDNA followed by Touch-down PCR using specific primer for amplification of coat protein gene. PCR product was electrophoresed in a 1.7% agarose gel in TBE buffer and the band of 420 bp related to CGMMV was detected .This is the first report of occurrence of CGMMV in different regions of Razavi and Northern Khorasan provinces