تشخيص مولكولي ژن‌هاي پمپ تراوشي AdeABC در سويه‌هاي باليني آسينتوباكتر بوماني و ارزيابي نقش آن در ايجاد مقاومت نسبت به ايميپنم

Molecular detection of AdeABC efflux pump genes in clinical isolates of Acinetobacter baumannii and their contribution in imipenem resistance

زمينه: يكي از مشكلات ايجاد شده توسط آسينتوباكتر بوماني بروز مقاومت چند دارويي مي‌باشد. پمپ‌هاي تراوشي ايجاد كننده مقاومت چند دارويي نقش اساسي را در ايجاد مقاومت در اين باكتري ايفا مي‌كنند. هدف از انجام اين مطالعه بررسي فراواني ژن‌هاي كد كننده پمپ تراوشي AdeABC در ايزوله‌هاي باليني آسينتوباكتر بوماني و ارزيابي نقش آن در ايجاد مقاومت نسبت به ايميپنم بوده است. مواد و روش‌ها: 56 ايزوله اسينتوباكتر بوماني از نمونه‌هاي باليني مختلف بيمارستان ولي‌عصر اراك جمع‌آوري شد و توسط آزمايش‌هاي بيوشيميايي استاندارد تعيين هويت شدند. الگوي حساسيت آنتي‌بيوتيكي با استفاده از روش ديسك ديفيوژن و حداقل غلظت بازدارنده ايميپنم در حضور و عدم حضور مهار كننده پمپ تراوشي CCCP در ايزوله‌ها با استفاده از نوارهاي E-test مطابق با دستورالعمل‌هاي CLSI تعيين گرديد. ژن‌هاي پمپ تراوشي AdeABC با استفاده از روش PCR در ايزوله‌ها شناسايي شدند. يافته‌ها: تمامي 56 ايزوله آسينتوباكتر بوماني نسبت به آنتي‌بيوتيك‌هاي سفوتاكسيم، سفتازيديم، سفوكسيتين، سفپيم، پيپراسيلين/ تازوباكتام، ازترونام و سيپروفلوكساسين مقاوم بودند، همچنين تمامي ايزوله‌ها با توجه به نتايج MIC نسبت به ايميپنم مقاوم بودند. حداقل غلظت بازدارنده ايميپنم در حضور مهار كننده پمپ تراوشي در ايزوله‌ها كاهشي نداشت. ژن‌هاي adeA و adeB در 100 درصد ايزوله‌ها و ژن adeC در 5/96 درصد ايزوله‌ها يافت شدند. نتيجه‌گيري: پمپ تراوشيAdeABC در ايجاد مقاومت نسبت به ساير آنتي‌بيوتيك‌ها نقش دارد و در ايجاد مقاومت نسبت به ايميپنم در ايزوله‌هاي مورد بررسي نقشي ندارد و مكانيسم‌هاي ديگر همچون آنزيم‌هاي كارباپنمازي در ايجاد مقاومت نسبت به اين آنتي‌بيوتيك نقش مهم‌تري را دارند.

Backgrand: Multi-drug resistance due to Acinetobacter baumannii strains has become a significant challenge. Efflux pump plays a vital role in the development of resistance in this bacteria. The aim of this study was to evaluate the frequency of the AdeABC efflux pump genes and its role in resistance to imipenem in clinical isolates of A.baumannii. Materials and methods: A total of 56 isolates of A.baumannii were collected from different clinical specimens of Valiasr hospital in the Arak –Iran and all isolates were identified by standard biochemical tests. The Antimicrobial susceptibility patterns were determined by disk diffusion method and minimum inhibitory concentrations of imipenemin via E-test strips with and without CCCP efflux pump inhibitor were determined according to CLSI guidelines. The PCR test was used to detect the AdeABC efflux pump genes in isolates. Results: All A.bumannii isolates were resistant to cefotaxim, ceftazidim, cefepim, cefoxitin, azteronam, piperacillin-tazobactam and ciprofloxacin, as well as all isolates were resistant to imipenem according to the results of the E-test method. Imipenem MIC with efflux pump inhibitor not reduced in all isolates and showed no differences in imipenem activity. The adeA, adeB and adeC genes were found in 100%, 100% and 96.5% of isolates, respectively. Conclusion: AdeABC efflux system contributes to resistance to other antibiotics and resistance to imipenem has not been involved with this efflux system in A.baumanni isolates in current study and other mechanism such as carbapenemase enzymes play vital role to imipenem resistance in A.baumanni isolates.