شناسايي تركيبات فنولي عصاره برگ درخت نيمبه روشكروماتوگرافي مايع با كارايي بالا و ارزيابي قدرت آنتي اكسيداني آنها

and determinationof their antioxidant activity Characterization of phenolic compounds presentin Neemleafextracts using HPLC

عصاره گيري از برگ درختنيم (Azadirachta indica L.)با منشا كشور هندوستان، با استفاده از دو حلال متانول 80% و آب و به سه روش دكوكشن، پركولاسيونو ماسريشن انجام گرديد. تعيين محتوي كل تركيبات فنولي عصارههابه روش فولين سيو كالتيو نشان مي داد كه استفاده از متانول 80% به مدت 7 روز (روش ماسريشن) بيشترين استخراج تركيبات فنولي را سبب خواهد شد. اين در حالي است كه تعيين ميزان روبش راديكال آزاد عصاره ها به روش DPPHنشان مي داد كه عصاره بدست آمده با استفاده از متانول 80% به مدت 24 ساعت (روش پركولاسيون) داراي بيشترين قدرت روبش راديكال هاي آزاد بوده و به عنوان موثرترين عصاره در نظر گرفته مي شود. تعيين هويت تركيبات فنولي موجود درعصاره مذكور به روش كروماتوگرافي مايع با كارايي بالابصورت كمي و كيفينشان مي دادكه نيمبوليد با 05/2896 ميلي گرم به ازا 100 گرم عصاره، عمده‌ترين ليمونويد تري‌ترپن و پس از آن اسيد‌هاي فنولي و 2و3-دهيدروسالانول به ترتيب با38/635 و 94/531 ميلي گرم به ازا 100 گرم عصاره عمده ترين تركيبات فنولي اين عصاره هستند. نتايج تست گرمخانه گذاري (13 روز، دماي ?60)به منظور بررسي اثر آنتي اكسيداني عصاره بدست آمده به روش پركولاسيون نشان مي داد كه نمونه روغن سويا با غلظت 2000 ppm عصاره، بيشترين فعاليت آنتي اكسيداني را تا روز چهارم در مهار تشكيل محصولات اوليه اكسيداسيون داشته در حالي كه اين غلظت قادر بود تشكيل محصولات ثانويه اكسيداسيون را تا روز سيزدهم مهار نمايد.

Indian Neem (Azadirachta indica L.) leaf was extracted by three different extraction methods (Decoction, Percolation and Maceration) using two different solvents; methanol 80% (v/v) and water. Determination of total phenolic content by Folin-Ciocalteu method revealed that methanol 80% (v/v) for 7 days (maceration method) cause the highest quantity of extracted phenolic compounds. Meanwhile, determination of radical scavenging activity of three different extracts by DPPH method indicated that methanol 80% (v/v) for 24 h (percolation method) cause the highest RSA and was considered as the most effective extract. Furthermore, qualitative and quantitative characterization of phenolic compounds of percolation extract as the effective extract using HPLC revealed that Nimbolide (2896.05 mg/100 g extract) is the main limonoid triterpen followed by phenolic acids and 2?, 3?-dehydrosalannol which are 635.38 and 531/94 mg/100g extract, respectively. Determination of antioxidative effects of percolation extract in refined soybean oil (without antioxidant) using accelerated oven test (13 days, 60?) declared that soybean oil containing 2000 ppm of the percolation extract was more stable than other concentrations until 4th day in terms of hydroperoxide when the aforementioned concentration was able to make the oil more stable until 13th day in terms of aldehydes and ketones.