شناسايي گونه‎هاي كانديداي جدا شده از موارد ولوو واژينيت كانديدايي با مقايسه دو روش كشت و مولكولي ابداعي در سال 1391

Identification of Candida species associated with vulvovaginal candidiasis by comparison of an innovative molecular method with culture in 2013

چكيده زمينه و هدف: ولوو واژينيت كانديدايي عارضه متداولي در خانم‎ها محسوب مي‎شود. هدف اين مطالعه شناسايي عوامل ولوو واژينيت كانديدايي با روش مولكوليPCR ابداعي(با استخراجDNA ازخود نمونه‎ها) و مقايسه آن با روش‎هاي كشت بود. مواد و روش‎ها: در اين مطالعه تجربي- تحليلي از150 خانم در سنين باروري با استفاده از اسپكولوم گذاري از ترشحات واژينال دو نمونه گرفته شد. يكي از اين نمونه‎ها جهت استخراج مستقيمDNA از آنها وPCR و ديگري جهت آزمون‎هاي فنوتيپي(كشت) استفاده شد. آزمون‎هاي فنوتيپي با استفاده از كشت روي محيط كورن ميل آگار، تشكيل جرم تيوب و توليد كلاميدوسپور و به ويژه رنگ كلوني روي محيط كروم آگار انجام شدند. PCR با استفاده از DNA استخراج شده از نمونه‎ها و در نهايت تعيين آمپليكون مربوط به حضور كانديداها به عمل آمد. يافته‎ها: از تعداد 150 نمونه، 87 نمونه با روش كشت و 127 نمونه با روش مولكولي(PCR معرفي شده) مثبت بود. از بين 87 نمونه مثبت جدا شده در كشت، 73 مورد كانديدا آلبيكنس و12 موردكانديدا گلابراتا و 2 مورد كانديدا تروپيكاليس به دست آمد. ليكن از ميان 127 نمونه مثبت تشخيص داده شده درPCR ، 107 مورد كانديدا آلبيكنس و 18 مورد كانديدا گلابراتا و 2 مورد كانديدا تروپيكاليس به دست آمد. انطباق روش كشت با روش مولكولي برابر 68 درصد بود. نتيجه‎گيري: روش مولكولي به كار گرفته شده توانايي شناسايي راحت و صحيح عوامل كانديدايي در ولوو واژينيت را داشته و از آن مي‎توان در تشخيص كانديدا در نمونه‎ها استفاده كرد. واژگان كليدي: كانديدا، كشت، واكنش زنجيره‎اي پلي مراز، ولوو واژينيت

Abstract Background: Vulvovaginal candidiasis is a common problem in women. The purpose of this study was to compare two identification methods; new PCR analysis (with DNA extracted from samples) and conventional culture technique in detection of Candida species in vulvovaginal samples. Material and Methods: In this experimental-analytical study, 150 women of fertility ages participated and two vaginal discharge samples were collected by speculum. One sample used for direct DNA extraction as well as PCR and the other was used for culture and phenotypic evaluations. Phenotypic evaluations waere performed by germ tube and chlamydospore formation and specially culture in chrome agar medium to detect color of the colonies. PCR was performed by DNA extracted from samples as templates and finally size of Candida specific amplicons was determined. Results: From 150 samples, 87 in culture and 127 in new PCR technique were positive. In culture method, from total 87 Candida species , 73 C. albicans, 12 C. glabrata and 2 C. tropicalis were isolated whereas in new PCR technique, from total 127 candida species 107 C. albicans, 18 C. glabrata and 2 C. tropicalis were identified. Concordance of the two methods were calculated as 68 percent. Conclusions: The new molecular method (innovative PCR) has the potential to rapidly and accurately diagnose Candida vulvovaginitis in patients and can be used for diagnosis of Candida species in clinical specimens. Keywords: Candida, Culture, Polymerase Chain Reaction, Vulvovaginitis