فلور قارچي همراه با علايم داخلي بيماري زوال انگور در استان كرمان

Fungal flora associated with internal symptoms of grapevine decline in Kerman province

در طول بهار و تابستان سال 1391 براي شناسايي قارچ هاي بيمارگر و علايم بيماري همراه با زوال درختان انگور، از مناطق مختلف استان كرمان بازديد به عمل آمد و از شاخه و تنه درختان داراي علايم زوال، نمونه برداري شد. جداسازي عوامل قارچي از بافت هاي تغيير رنگ يافته چوب و با استفاده از محيط كشت عصاره مالت-آگار (Malt Extract Agar = MEA) حاوي 100 ميلي گرم بر ليتر از سولفات استرپتوميسين (MEAS) انجام شد. جدايه هاي به دست آمده بر اساس ويژگي هاي ريخت شناختي و محيط كشت شناسايي شدند. شناسايي ريخت شناختي جدايه هاي Phaeoacremonium با تكثير و تعيين ترادف بخشي از ژن بتا توبولين (b-tubulin gene) با استفاده از دو آغازگر T1 و Bt2b و شناسايي جدايه هاي Botryosphaeria با تكثير و تعيين ترادف بخشي از ناحيه ITS (ITS1+ 5.8S+ ITS2) با استفاده از دو آغاز گر ITS4 و ITS5 مورد تاييد قرار گرفت. در اين مطالعه، 476 جدايه قارچي از درختان بيمار به دست آمد. دو گونه Phaeoacremonium aleophilum و Phaeomoniella chlamydospora به ترتيب با 103 و 50 جدايه داراي بيشترين فراواني بودند. اين نخستين گزارش از شناسايي مولكولي گونه هاي Pm. aleophilum، Pa. chlamydospora، Pm. parasiticum و Botryosphaeria dothidea همراه با علايم متنوع داخلي زوال انگور در استان كرمان مي باشد.

To study of fungi and symptoms associated with vine trunk diseases, various vineyards in Kerman province were inspected during spring and summer of 2012. Samples showing decline symptoms were collected from trunk and branches of vines. Fungal isolation from affected tissues were done on malt extract agar medium (MEA) supplemented with 1 g l–1 streptomycin sulphate (MEAS). A total of 476 fungal isolates from diseased grapevines were obtained. Fungal isolates were identified based on their morphological and molecular characteristics. Morphological identifications of Phaeoacremonium spp. were confirmed by sequence analysis of partial B-tubulin gene (BT) sequences amplification using primers T1 and Bt2b. Botryosphaeria isolates were also confirmed by amplification and sequence of the internal transcribed spacer (ITS) region using the primers ITS4 and ITS5. The most common fungi isolated from vineyards were Phaeoacremonium aleophilum and Phaeomoniella chlamydospora with 103 and 30 isolates, respectively. This is the first report of molecular identification of Pm. aleophilum, Pa. chlamydospora, Pm. parasiticum and Botryosphaeria dothidea associated with different internal symptoms of vine decline in Kerman province