بررسي آلودگي گوشت گوساله عرضه شده در سطح شهر اصفهان به كلستريديوم ديفيسيل با روش كشت و واكنش زنجيره اي پليمراز با تكنيك چندتايي

Examination of Clostridium difficile Contamination in beef meat distributed in Isfahan using culture and Multiplex-PCR method

مقدمه: در سال‏هاي اخير احتمال انتقال كلستريديوم ديفيسيل با مصرف مواد غذايي به انسان با افزايش عفونت اين باكتري در جامعه مطرح شد. در اين ميان پژوهش‏هاي گسترده‏تري از وضعيتكلستريديوم ديفيسيل در گوشت قرمز كشور‏هاي مختلف دنيا نسبت به مواد غذايي ديگر انجام شد. مطالعه حاضر با هدف بررسي شيوع كلستريديوم ديفيسيل در گوشت گوساله انجام گرفت‏‏. مواد و روش‏‏‏ها: 100 نمونه از گوشت گوساله عرضه شده در دو شكل تكه‏اي و چرخ كرده از قصابي‏‏هاي مناطق مختلف شهراصفهان براي انجام آزمايش‏ها جمع آوري شد. پس از انجام مراحل كشت و تاييد پرگنه‏هاي مثبت كلستريديوم ديفيسيل با آزمون‏هاي بيوشيميايي، روش مولكولي PCR با تكنيك چندتايي جهت تشخيص سه ژن ايزومراز تري فسفات، زهرابه آ و زهرابه ب انجام گرفت. بررسي ارتباط بين شيوع كلستريديوم ديفيسيل در دو شكل تكه‏اي و چرخ كرده گوشت گوساله در نرم افزار آماري SPSS (ويرايش 16) با آزمون مربع كاي در سطح معني داري Pvalue < 0.05 انجام گرفت. نتايج: كلستريديوم ديفيسيل در 12 نمونه (12 درصد‏) از گوشت‏هاي گوساله جداسازي شد. از بين 12 نمونه، دو نمونه (4 درصد‏) به گوشت تكه‏اي و 10 نمونه (20 درصد) به گوشت چرخ كرده مربوط بود. همه پرگنه‏هاي جداسازي شده از هر سه ژن مورد بررسي برخوردار بودند. تفاوت معني‏داري در شيوع كلستريديوم ديفيسيل در دو نوع از گوشت‏هاي مورد بررسي مشاهده شد (01/0=Pvalue). بحث و نتيجه‏گيري: در اين مطالعه، ميزان جداسازي كلستريديوم ديفيسيل در گوشت‏هاي چرخ كرده گوساله نسبت به شكل تكه‏اي افزايش داشت كه مي‏تواند به علت عدم رعايت اصول بهداشتي در شست و شو و تشكيل احتمالي بيوفيلم در دستگاه‏هاي چرخ گوشت باشد. همچنين، نتايج اين مطالعه نشان داد كه مصرف گوشت گوساله به‏عنوان يك مخزن احتمالي از كلستريديوم ديفيسيل در انتقال اين باكتري به انسان مي‏تواند عمل كند.

Introduction: With regard to increasing of community associated Clostridium difficile infection in recent years, the probable transmission of Clostridium difficile from food to human was supposed. Most of reports on this issue were allocated to examine the prevalence of Clostridium difficile in red meat. The current study aimed at examination of the prevalence of Clostridium difficile in beef meat. Materials and methods: A total of 100 beef meat samples including 50 chopped and ground for each ones were collected from butcheries in different regions of Isfahan for cultural analysis and biochemical tests. Molecular evaluation of Clostridium difficle was confirmed by multiplex polymerase chain reaction directed on existence of tpi, tcdA and tcdB genes. Chi-square test was performed for descriptive statistics with Pvalue? 0.05 in SPSS software. Results: Clostridium difficile was isolated form 12 (12%) of beef meat samples. Among isolated colonies, 2 (4%) and 10 (20%) were belonged to chopped and ground beef meat, respectively. All colonies contained all genes. The significant difference was observed within the type of meat and Clostridium difficile prevalence (Pvalue=0.01). Discussion and conclusion: The results of the present study showed the higher incidence of Clostridium difficile in ground meat than chopped ones. It seems that the formation of biofilm in meat grinder was the reason of higher rate of contamination. Furthermore, the consumption of beef meat as a source for Clostridium difficile might transmit the organism to human. Key words: Clostridium difficile, Beef meat, Multiplex polymerase chain reaction