مقايسه روش هاي بيوشيميايي و مولكولي در تشخيص و شناسايي گونه هاي كانديداي عامل ولوواژينيت شايع و عود كننده

Comparison of Biochemical and Molecular Methods for the Identification of Candida Species Causing Vulvovaginal Candidiasis and Recurring Vulvovaginal Candidiasis

زمينه و اهداف: كانديديازيس ولوواژينال (VVC) يكي از شايعترين عفونت هاي ناحيه واژينال مي باشد و در مواردي بدليل دخالت سويه هاي مقاومC. albicans و يا گونه هاي ديگر غير آلبيكانس عود مجدد بيماري RVVC رخ مي دهد. در اين مطالعه، كشت بر روي كروم آگار و روش مولكولي PCR-RFLP صرفا به لحاظ توانايي تفكيك بين گونه اي و سرعت عمل مقايسه گرديد. مواد و روش كار: نمونه سواب واژينال زنان علامت دار در تيوب هاي مخصوص به آزمايشگاه ارسال گرديد. تمامي نمونه ها بر روي محيط كروم آگار كانديدا برده شده، پس از انكوباسيون رنگزايي حاصل رشد مخمر با الگو هاي استاندارد مقايسه شدند. همچنين روش PCR-RFLP با كاربرد آنزيم محدودساز Msp I براي شناسايي سويه ها مورد استفاده قرار گرفت. يافته‌ها: بطوركلي از 192 نمونه بيمار علامت دار ولوواژينيت مورد مطالعه، 90 سويه كانديدايي به دست آمد كه 11 سويه مربوط به بيماران با عفونت راجعه بودند. يافته هاي مولكولي شامل: كانديدا آلبيكانس 71 (78.8% ) ، كانديدا گلابراتا 7 (7.7% ) ، كانديدا پاراپسيلوزيس 6 (6.6% ) ، كانديدا تروپيكاليس 4 (4.4% ) و كانديدا كروزيي 2 جدايه (2.2% ) بودند كه بسيار نزديك به داده هاي روش كروم آگار مي باشد. نتيجه‌گيري: با توجه به اينكه روش مولكولي از سرعت عمل بالاتر حدود 6-5 ساعت پس از يك كشت شبانه نسبت به روش بيوشيميايي برخوردار بود لذا كاربرد روش آزمون شده در شناسايي گونه هاي كانديداي عامل VVC و RVVC به همراه روش هاي مبتني بر كشت توصيه مي گردد.

Background and Aim: Vulvovaginal candidiasis (VVC) is a common clinical problem that affects most adult women at least once during their life time. Many also have frequently recurring yeast infections (RVVC) caused by Candida albicans and non albicans Candida species. We studied use of CHROMagar Candida and PCR-RFLP to compare their differential ability and time consuming. Materials and Methods: Vaginal discharge samples of all women with clinical signs were cultured on CHROM agar Candida medium .After an overnight incubation at 37°C, growth coloration of Candida isolates compared with those of standard patterns. PCR-RFLP using restriction enzyme Msp I were used for the identification of more Candida isolates in the level of species. Results: Totally 192 vaginal discharge samples were obtained from the women with vulvovaginitis clinical signs. 90 patients had Candida vulvovaginitis, 11 case were RVVC. The Candida species which were identified included, C.albicans (78.8%), C.glabrata (7.7 %), C. parapsilosis (6.6%) , C. tropicalis (4.4 %) and C. krusei (2.2 %). Conclusions: We concluded that, use of PCR-RFLP is recommended for the identification of Candida species causing VVC and RVVC in accompany with the culture based methods, regarding to its differential power and speed.