جداسازي، كشت و تمايز سلول هاي بنيادي مزانشيمي مشتق از مغز استخوان انسان به سلول هاي رده استخوان

Isolation, culture and differentiation on human bone marrow derived mesenchymal stem cells into osteogenic lineage

مقدمه و هدف: سلول هاي بنيادي مزانشيمي در بافت هاي متنوعي مثل مغز استخوان يافت مي شوند. اين سلول ها با دارا بودن ويژگي چندتواني، قابليت تمايز به انواع رده هاي مزودرمي را دارند. سلول هاي بنيادي مزانشيمي به عنوان كانديد مناسبي در سلول درماني معرفي شده اند. در اين تحقيق توانايي تمايز سلول هاي بنيادي مزانشيمي مشتق از مغز استخوان انسان به سلول هاي رده استخوان مورد بررسي قرار گرفته است. روش كار: پس از استخراج مغز استخوان از استخوان لگن افراد دهنده، مراحل جداسازي سلول ها صورت گرفت. سپس سلول-هاي جدا شده در محيط كشت مناسب كشت داده شدند. جهت تعيين هويت سلول ها از فلو سايتومتري استفاده شد. سلول هاي بنيادي مزانشيمي در محيط كشت تمايزي استخوان كشت داده شده و سپس رنگ آميزي اختصاصي صورت گرفت. يافته ها: نتايج آناليز فلو سايتومتري نشان داد كه اين سلول ها نسبت به ماركرهاي 45 CDو80 CD منفي مي باشند، در حالي كه نسبت به ماركر90 CD مثبت هستند و سلول هاي بنيادي مزانشيمي پس از 21 روز به سلول هاي استخواني تمايز يافتند. نتيجه گيري: نتايج اين تحقيق نشان داد كه سلول هاي بنيادي مزانشيمي مشتق از مغز استخوان انسان يكي از منابع مهم سلول هاي بنيادي مي باشند كه توانايي تمايز به رده استخوان را دارا مي باشند.

Introduction & Objective: Mesenchymal stem cells from various sources such as bone marrow are available. These cells have multipotent capacity to differentiate into mesodermal cell lineages. Mesenchymal stem cells are one of the major candidates in cell therapy. The aim of this study was the isolating of mesenchymal stem cells derived from human bone marrow and assessing their ability for differentiation into osteocyte. Materials and Methods: Bone marrow was aspirated from human normal donor after informing consent. Cells were isolated and cultured. Identification of cells with flow cytometric analysis was performed. For osteogenic differentiation, the 4th-passage cells were treated with osteogenic medium for three weeks and specific staining was done. Results: Flow cytometric analysis showed that the human bone marrow mesenchymal stem cells were positive for CD90 and negative for CD45 and CD80. Stem cells derived from bone marrow could differentiate to osteocyte cells after 21 days. Conclusion: Results of this research indicated that stem cells derived from human’s bone marrow are an important source of stem cells. They have the potential for osteogenic differentiation. Key word: Mesenchymal Stem Cells, Human Bone Marrow, Osteocytes, Differentiation