اندازه گيري ميزان آفلاتوكسين در زعفران به وسيله كروماتوگرافي مايع با كارايي بالا و تخليص با ستون ايمونوافينيتي

Aflatoxin Determination in Saffron by High-Performance Liquid Chromatography and Immunoaffinity Column Clean-up

در اين تحقيق يك روش جهت اندازه گيري آفلاتوكسين در زعفران با استفاده از كروماتوگرافي مايع با كارايي بالا مجهز به آشكارساز فلورسانس ارايه شده است. در اين روش آفلاتوكسين با استفاده از متانول 80% استخراج و سپس توسط ستون ايمونوافينيتي تخليص شد. اندازه گيري ها در طول موج تحريك 365 و طول موج نشري 445 نانومتر انجام گرفت. حد تشخيص آفلاتوكسين هاي B1، B2، G1و G2 به ترتيب 293/0، 08/0 ، 55/0 و 30/0 مي باشد. درصد انحراف استاندارد نسبي در اندازه-گيري انواع آفلاتوكسين بين 1/5-33/1 و ميزان درصد بازيافت نيز در محدوده 67-94 مي باشد. با توجه به نتايج روش كروماتوگرافي مايع با كارايي بالا به كار گرفته شده در اين تحقيق مي توان به توانايي اين روش در تعيين و اندازه گيري گونه هاي مختلف آفلاتوكسين در زعفران پي برد.

In this paper, method based on high performance liquid chromatography with fluorescence detection has been suggested to measure aflatoxin in saffron. This method required a simple extraction of aflatoxin using MeOH/H2O (80:20, v/v) and a purification by immunoaffinity column cleanup. Aflatoxin measurement was performed at an emission wavelength of 445 nm and an excitation wavelength of 365 nm. Detection limits for AFB1, AFB2, AFG1 and AFG2 were 0.293, 0.08, 0.55, and 0.30 ng g-1, respectively. The percentage of Relative standard deviations for measuring aflatoxin is in the range of 1.33-5.10 % and the percentage of recovery is in the range of 94-67. Regarding The overall results of high-performance liquid chromatography applied in this experiment, we can realize that this method can be used for detection and measurement of different kinds of aflatoxins in saffron.