اثر هم افزايي عصاره آبي زعفران (Crocus sativus L) و ويتامين D3 بر تمايز استيوژنيك سلول هاي بنيادي مزانشيمي در مغز استخوان موش صحرايي

Synergism between the aqueous extract of saffron (Crocus sativus L) and vitamin D3 on osteogenic differentiation of rat bone marrow mesenchymal stem cells

سابقه و هدف: زعفران داراي اثرات فارماكولوژيك متعددي بوده و ويتامين D3 نيز در تمايز و عملكرد بسياري از سلول ها دخالت دارد. در مطالعه حاضر اثر هم افزايي عصاره آبي زعفران و ويتامين D3 بر تمايز سلول هاي بنيادي مزانشيمي به استيوبلاست بررسي شده است. مواد و روش ها: سلول هاي بنيادي مغز استخوان موش صحرايي نژاد ويستار استخراج شده و شناسايي به كمك روش ايمونوسيتوشيمي انجام شد. در گروه هاي تجربي، سلول هاي بنيادي با غلظت هاي 600، 700 و800 ميلي گرم در ليتر زعفران و نيز غلظت هاي فوق الذكر زعفران همراه با غلظت 7-10×5 مولار ويتامين D3 جهت القا تمايز استفاده شد. گروه كنترل هيچ گونه تيماري دريافت نكرد. تمايز سلول ها با سنجش فعاليت آنزيم آلكالين فسفاتاز پس از 10 روز و رنگ آميزي آليزارين رد در روز 21 پس از تيمار بررسي گرديد. نتايج: فعاليت آلكالين فسفاتاز گروه هاي دريافت كننده ويتامين D3 و زعفران در مقايسه با شاهد افزايش معني داري داشت. هم چنين، ميزان فعاليت اين آنزيم در گروه هاي تيمار توام زعفران و ويتامينD3 نسبت به كاربرد هريك به تنهايي افزايش داشت. رنگ آميزي آليزارين رد، اثرات تمايزي ويتامين D3، زعفران و تيمارهاي توام آنها بر سلول هاي بنيادي به سمت به استيوبلاست را نشان داد و بيشترين اثر تمايزي در گروه تجربي زعفران همراه با ويتامين D3 مشاهده شد. نتيجه گيري: كاربرد توام زعفران و ويتامين D3 داراي اثرات معني دار در تمايز سلول هاي بنيادي مزانشيمي مغز استخوان به استيوبلاست ها مي باشد.

Background: Saffron has the various significant pharmacological effects.Vitamin D3 is also involved in differentiation and functions in various cells. This study aimed to investigate the synergetic effects of the aqueous extract of saffron and vitamin D3 on the differentiation of mesenchymal stem cells into osteoblasts. Materials and Methods: Flushing method was used to extract mesenchymal stem cells. Immunocytochemistry agonist CD44 antigen was also used to verify the identification of stem cells. In the experimental group, cells were treated with 600,700,800 mg/l doses of the saffron extract and the above-mentioned doses of saffron with 5×10-7 M of vitamin D3 were used to induce differentiation. The control group did not receive any treatment. Cell differentiation was evaluated by the alkaline phosphatase activity assay after 10 days and Alizarin Red staining was also performed 21 days after the treatment. Results: Alkaline phosphatase activity in the vitamin D3 and saffron groups showed a significant increase compared to the control groups. The activity of this enzyme in the combined treatment groups showed a significant increase compared to their single use. The Alizarin Red staining showed the differentiative effects of vitamin D3, saffron and their coadministration in the differentiation of stem cells into osteoblast.The saffron and Vitamin D3 coadministration has the most profound effect on the differentiation of mesenchymal stem cell into osteoblast. Conclusion: The results indicate that the coadministration of saffron and vitamin D3 has a significant effect on the differentiation of mesenchymal stem cell into osteoblast cells.