جداسازي و شناسايي مولكولي باكتري تجزيه كننده هگزادكان از كمپوست

Isolation and molecular identification of n-hexadecan degrading bacteria from compost

سابقه و هدف: امروزه نشت مواد نفتي از خطوط انتقال، پالايشگاه و جايگاه هاي سوخت و ورود آنها به خاك و آب هاي زيرزميني به يكي از مهم‌ترين چالش‌هاي زيست‌محيطي ايران تبديل شده است. اين مطالعه با هدف جداسازي و شناسايي مولكولي يك باكتري تجزيه‌كننده هگزادكان از كمپوست انجام شد. مواد و روش‌ها: در اين پژوهش هگزادكان به عنوان آلاينده‌ مدل هيدروكربن‌هاي گازوييل انتخاب گرديد. به منظور جداسازي باكتري‌هاي تجزيه‌كننده‌ هگزادكان، از كمپوست رسيده استفاده شد. در ادامه يك باكتري انتخاب و به كمك روش PCR شناسايي گرديد. در نهايت كارايي باكتري جداسازي شده جهت حذف هگزادكان به عنوان تنها منبع كربن و نيز ميزان رشد باكتري در غلظت‌هاي مختلف كلريد سديم مورد بررسي قرار گرفت. يافته‌ها: بر اساس روش هاي مورفولوژي، بيوشيميايي و تعيين توالي اين باكتري به عنوان اسفينگوموناس يانوي‌كويايه شناسايي شد. اين باكتري پس از 33 روز در دماي 30 درجه سانتي گراد قادر به حذف 69/49 درصد از هگزادكان بود. به طوري كه ميزان هگزادكان از 3000 به 1510 ميلي‌گرم بر ليتر رسيد. همچنين باكتري مورد نظر در برابر شوري داراي مقاومت متوسط بود به طوري كه توانست در غلظت 5/2 درصد نمك نيز رشد نمايد. نتيجه‌گيري: اين پژوهش نشان مي‌دهد كه در شرايط آب و هوايي گرم و خاك نسبتاً شور ايران، مي‌توان از باكتري اسفينگوموناس يانوي‌كويايه به منظور حذف تركيبات نفتي به‌ويژه گازوييل استفاده نمود. از اين رو انجام مطالعات تكميلي در سطح گسترده تر پيشنهاد مي گردد. Background and Objectives: Contamination of soil and groundwater by diesel released from underground storage tanks is an important and extensive environmental challenge in Iran. The aim of this study was to isolate and molecular identification of n-hexadecane-degrading bacteria from compost. Materials and Methods: In this study, hexadecane was used as a model for contamination to diesel oil. We used compost in order to isolate hexadecane degrading bacteria. Then, the selected bacteria was identified using PCR method. Finally, the efficiency of isolated bacteria for consumption of hexadecane as sole source of carbon and the growth rate of the bacteria in different concentrations of NaCl were evaluated. Results: Based on morphology, biochemical tests and sequencing, the isolated bacteria identified as Sphingomonas yanoikuyae. This bacteria could remove 49.69% of n- Hexadecane after 33 days in 30 C. The concentration of n- Hexadecane decreased from 3000 mg to 1510 mg. In addition, the results showed that isolated bacteria can growth on 2.5% salinity. Conclusion: The results of this study showed that S. yanoikuyae can be used in remediation of petroleum products, especially diesel oil, in tropical and semi-salinity area in Iran. Therefore, further investigations using molecular approaches is recommended