بررسي مولكولي ارتباط اگزوتوكسين A با مقاومت پادزيستي سويه‌هاي سودوموناس آيروژينوزا جدا شده از بيماران مراجعه‌كننده به بيمارستان‌هاي شهر تهران

Molecular analysis of Exotoxin A Associated with Antimicrobial Resistance of Pseudomonas aeruginosa Strains Isolated from Patients in Tehran Hospitals

زمينه و اهداف: سودوموناس آيروژينوزا يك باكتري منحصر به فرد است كه در محيط هاي مختلف، طي يك پروسه سازگاري پيچيده، جهت ادامه حيات، تغييرات مختلفي در بيان ژن هاي ويرولانس و مقاومت دارويي خود ايجاد مي‌نمايد. هدف اين تحقيق بررسي وجود ارتباطي منطقي بين اگزوتوكسين A و مقاومت پادزيستي در سويه هاي واجد اين ژن است. مواد و روش كار: تست آنتي بيوگرام به روش انتشار ديسك (Kirby Bauer) براساس پروتوكل CLSI انجام شد. در اين تحقيق، وجود ژن toxA به كمك واكنش زنجيره اي پليمراز (PCR) در 102 سويه باليني از نمونه هاي خون، زخم، ادرار و تراشه مورد بررسي قرار گرفت. براي بررسي ارتباط بين اگزوتوكسين A و مقاومت پادزيستي از آزمون كاي 2 استفاده گرديد. يافته‌ها: 81 سويه (4/79%) +toxA بودند. فراواني ژن toxA در سويه هاي جدا شده از عفونت هاي مختلف عبارت بود از زخم (4/91%)، خون (7/85%)، تراشه (7/72%) و ادرار (1/42%). شاخص مقاومت چندگانه در سويه-هاي واجد ژن toxA، 75% محاسبه گرديد. نتيجه آزمون كاي 2 براي تعيين ارتباط بين مقاومت دارويي و وجود ژن toxA معني دار بود (P < 0.05). نتيجه‌گيري: مقدار معني داري آزمون كاي 2 و افزايش مقاومت چندگانه در سويه هاي +toxA جدا شده از بيماران بستري، مي‌تواند بيانگر سوييچ ژنتيكي قابل توجه بين فعاليت اگزوتوكسين A و مقاومت پادزيستي، به ترتيب در عفونت هاي خون، ادرار، تراشه و زخم باشد كه منجر به روشن شدن ژن هاي تنظيم كننده مقاومت دارويي در باكتري مي‌گردد. اين نتايج با روش هاي ساترن بلات، آناليز بيان ژن toxA و تعيين مكانيسم مقاومت در سويه هاي مقاوم قابل بررسي خواهد بود.

Background and Aim: Pseudomonas aeruginosa is a unique bacteria that in order to survive in different environments by complex adaptation process can make changes in his virulence genes expression and drug resistance. The aim of this research is the investigation of existence of a logical association between toxA gene and antibiotic resistance in strains possess the gene. Materials and Methods: Antibiogram test by disk diffusion method (Kirby Bauer) was performed according to CLSI protocols. In this study, the existence of toxA gene with the help of polymerase chain reaction (PCR) in 102 clinical isolates from blood samples, wound, urine and trachea was examined. Chi-square test was used to investigate the relationship between exotoxin A and antibiotic resistance. Results: The 81 strains (79.4%) had toxA gene. Frequency of toxA genes in isolated strains from different infections were wound (91.4%), blood (85.7%), trachea (72.7%), and urine (42.1%). Multiple resistance index in strains possess the toxA gene was calculated 75%. Chi 2 test to determine the relationship between drug resistance and gene toxA was significant (P < 0.05). Conclusions: The significant chi-square test and an increase in multi-resistant strains possessing the toxA gene, can represent a considerable genetic switch between exotoxin A activity and resistance to antibiotics in the blood, urine, tracheal, wound infections Respectively, which lead to turn genes on of drug resistance regulating in bacteria. The results of this study will be verified by southern blot, analysis of the expression of toxA gene and determine the mechanism of resistance in resistant strains Methods.