مطالعه روند رويان زايي ميكروسپورهاي كلزا رقم پي اف (PF704) در شرايط درون شيشه اي با استفاده از ميكروسكوپ الكتروني

Study of In vitro microspore embryogenesis of rapeseed (Brassica napus L. cv. PF704) with electron microscopy

در اين تحقيق، ساختار سلولي ميكروسپور هاي كلزا رقم پي اف (PF704)، در مسير هاي رشد و نموي گامتوفيتي و رويان زايي در شرايط درون شيشه اي (in vitro) با رشد و نمو گامتوفيتي ميكروسپورها در شرايط برون شيشه اي (in vivo) از طريق مشاهدات ميكروسكوپ الكتروني مقايسه مي گردند. برنامه ريزي مجدد ميكروسپور ها به طرف رويان زايي شامل يك سري تغييرات مشخص است كه فعاليتهاي سلول و سازماندهي ساختاري آن را تحت تاثير قرار مي دهد و اين تغييرات مي توانند به عنوان نشانگرهايي براي مسير رشد ونموي رويان زايي ميكروسپورهاي كلزا در نظر گرفته شوند. در اين تحقيق ميكروسپور هاي كلزا رقم پي اف در روز هاي مختلف پس از كشت در شرايط درون شيشه اي استخراج و براي مطالعات ميكروسكوپ الكتروني نمونه هايي تهيه گرديد. در مراحل مختلف رشد و نمو ميكروسپورها، تفاوت در صفات سلولي خاصي از قبيل شكل و اندازه سلولي، معماري هسته سلول، تجمع نشاسته و حضور واكويلها، جهت شناسايي مراحل متوالي رويان زايي ميكروسپورها و مسير هاي رشد و نموي ديگر در شرايط درون شيشه اي مورد مطالعه قرار گرفتند. نتايج اين تحقيق نشان داد كه حضور فراوان دانه هاي نشاسته در يك ناحيه خاص از سيتوپلاسم مي تواند صفت ويژه رشد و نمو گامتوفيتي در شرايط درون شيشه اي و همچنين ميكروسپور هاي غير القا شده در شرايط القا رويان زايي باشد.

In this research, ultrastructure of rapeseed (Brassica napus L.cv. PF704) microspores following the gametophytic and embryogenic developmental pathways in vitro was compared with the gametophytic development in vivo via electron microscopy. In reprogramming of rapeseed microspores to the embryogenesis pathway, there are some defined changes influencing the cell activities and structure. Some of these changes can be considered as microspore embryogenesis pathway in rapeseed. In this study, rapeseed microspores were isolated at different days after in vitro culture and prepared for electron microscopy studies. During the different developmental stages of rapeseed microspores, Differences in specific cellular properties such as cell size and shape, nuclear architecture, starch accumulation, presence of vacuoles were studied to characterize different stages of microspore embryogenesis and other pathways occurring in vitro. Results, showed the presence of abundant starch grains in a defined cytoplasmic region appeared as a specific property of the gametophytic development in vitro, as well as of the non-induced microspores of in vitro cultures under embryogenic-inductive conditions.