بررسي بيان ژن 4 SALL در پروزنسفالن(مغز قدامي) طي تكوين جنين جوجه

Expressional analysis of SALL4 mRNA in prosencephalon during chicken embryogenesis

چكيده زمينه و هدف: با توجه به نقش ژن 4SALL در تكوين اندام‌هاي مختلف از جمله سيستم عصبي و مغز، در اين مطالعه بيان ژن 4 SALLدر طول تكوين جنين جوجه در بافت پروزنسفالن مغز و بيشترين ميزان بيان در طول رشد و نمو اين موجود مورد بررسي قرار گرفت. مواد و روش‌ها: در اين پژوهش تجربي در ابتدا از تخم مرغ‌هاي نطفه‌دار انكوبه شده در درجه حرارت 37-5/37 درجه سانتي‌گراد و رطوبت65 - 60 درصد استفاده شد. پس از شروع رشد و نمو جنيني قسمتي از بافت پروزنسفالن مغز روزانه از تخم مرغ‌ها جمع‌آوري گرديد. RNA تام استخراج و سنتز cDNA از بافت تفكيك شده انجام شد. cDNA سنتز شده به عنوان الگو براي بررسي كمي بيان 4SALL mRNA؛ به وسيله Real Time PCR استفاده شد. يافته‌ها: نتايج حاصل نشان مي‌دهد بيان ژن 4 SALLدر طول رشد و نمو جنين در پروز نسفالن متغير مي‌باشد، اما در روزهاي ابتدايي جنيني بيان آن نوسانات زيادي را نشان نمي‌دهد به طوري كه حداكثر تعداد نسخه‌هاي mRNA ژن 4SALL در 15 روز رشد و نمو جنيني تعيين شد. نتيجه‌گيري: بيان اين ژن در روزهايي كه رشد اندام‌ها و مغز قدامي در حال كامل شدن است افزايش بيشتري نشان مي‌دهد. با استفاده از جدول هامبورگ– هميلتون به نظر مي‌رسد ارتباطي بين افزايش بيان ژن 4SALL و رشد و نمو اندام‌هاي بينايي و نيم كره‌هاي مغز در حال تكوين وجود دارد. واژگان كليدي: بيان ژن، پروزنسفالن، تكوين جنين، Real time PCR،4

Abstract Background: According to the important of SALL4 gene during the development of embryonic neurvous system, our aim in this study was to analyze and quantify mRNA expression of SALL4 in Prosencephalon during different stages of chicken embryogenesis. Materials and Methods: In this experimental study, incubated Ross fertilized eggs were applied in 37°C-37.5°C in 60-65% humidified atmosphere after beginning of embryogenesis. Prosencephalon part of the brain tissue was collected from the eggs, daily. Total RNA extraction and cDNA synthesis was performed from resected tissues. The synthesized cDNA was used as template for quantitatively analysis of SALL4 mRNA expression by real-time PCR. Results: The Results indicate that the level of SALL4 gene expression is significantly variable during embryogenesis. However it doesn’t show variation during the early days. The maximum copy number of SALL4 mRNA was quantified on 15 th day of chicken development. Conclusion: SALL4 mRNA expression is high when the Prosencephalon is under development, using of HAMBURGER–HAMILTON chart, there is relation between increasing SALL4 expression and developing limbs and anterior brain. Keywords: Embryogenesis, Gene expression, Prosencephalon, Real time PCR, SALL4