مقايسه بار ويروس سيتومگال انساني در نمونه‌هاي خون تام و پلاسما بيماران دريافت كننده پيوند

Comparison of human cytomegalovirus load in whole blood and plasma samples of transplant recipient patients

چكيده زمينه و هدف: استفاده از روش Real-time PCR كمّي به عنوان روش استاندارد به منظور كمّيت سنجي ويروس سيتومگال انساني در بيماران داراي نقص سيستم ايمني مطرح شده است. با اين وجود اين سوال كه كداميك از نمونه‌هاي خون تام يا پلاسما براي اندازه‎گيري تيتر ويروس بهتر است براي بسياري از آزمايشگاه‌هاي باليني هنوز پاسخ داده نشده است. به منظور پاسخ دادن به اين سوال، مطالعه حاضر به مقايسه بار DNA ويروس سيتومگال انساني در دو نمونه پلاسما و خون كامل مي‌پردازد. مواد و روش‌‌ها: در يك مطالعه آينده‎نگر نمونه‌هاي خون تام و پلاسما از 41 بيمار دريافت كننده پيوند مورد ارزيابي قرار گرفت و بار ويروس سيتومگال به وسيله روش Real-time PCR خانگي معتبر شده سنجش گرديد. يافته‌ها: از مجموع 193 نمونه بررسي شده، تعداد 174 نمونه داراي نتايج منفي بودند و تعداد 19 نمونه از 16 بيمار در دست كم يكي از نمونه‌هاي پلاسما يا خون كامل مثبت شدند. بر اساس نتايج آناليز رگرسيون خطي، بين تيتر ويروس سيتومگال در دو نمونه خون تام و پلاسما هم‎بستگي وجود دارد(872/0R2= ). با اين وجود معادله رگرسيون نشان مي‌دهد كه تيتر ويروس سيتومگال انساني در نمونه‌هاي خون تام بالاتر از تيتر اين ويروس در نمونه‌هاي پلاسما مي‌باشد. اعتبار سنجي نتايج كمّي به وسيله تكرار آزمايش‎ها و آناليز نتايج به وسيله آزمون آماري اندازه گيري مكرر مورد تاييد قرار گرفت. نتيجه گيري: بر اساس نتايج حاصل از اين مطالعه، انجام آزمون‌هاي كمّيت سنجي ويروس سيتومگال انساني در نمونه خون تام داراي حساسيت آناليتيك بيشتري نسبت به نمونه پلاسما است. واژگان كليدي: ويروس سيتومگال انساني، بار ويروسي، كمّيت سنجي، Real-time PCR

Abstract Background: The Real-time PCR assay has been established as the standard method for Human Cytomegalovirus (HCMV) quantitation in immunocompromised patients. However, the question of which one of whole blood or plasma specimens is better for viral quantitation is still unresolved for many clinical laboratories. To answer this question, the current study compares HCMV DNA load in whole blood and plasma samples. Materials and Methods: In this prospective study, the whole blood and plasma samples were obtained from 41 transplantated patients and the viral load was detected using a validated, in-house Real-time PCR assay. Results: Of the total 193 examined specimens, 174 were negative and 19 samples, from 16 patients, were positive in at least one of whole blood or plasma samples. Based on the results of linear regression analysis, the cytomegalovirus viral load was correlated in whole blood and plasma samples (R2: 0.872). However, the regression equation shows that the HCMV load in whole blood samples is higher than load of this virus in plasma. The validity of the quantitative results was confirmed by repeating the tests and analyzing the results using the repeated measure analysis. Conclusion: Based on the results of the present study, HCMV quantitation in whole blood samples has a higher analytical sensitivity than in plasma samples. Keywords: Human cytomegalovirus, viral load, quantitation, Real-time PCR