بررسي اثر ضدقارچي اسانس چند گياه دارويي و دو نوع پارابن ‌دركشت درون شيشه‌اي گياه سيب (Malus domestica cv. Gala)

Antifungal Activity of Several Essential Oils of Medicinal Plants and Two Parabens on Apple (Malus domestica cv. Gala) In Vitro Culture

آلودگي محيط در كشت‌بافت، يكي از مشكلات رايج مي‌باشد كه مي‌تواند بخشي از كشت‌ و يا تمامي آن را از بين ببرد. در اين تحقيق، به منظور حذف و يا كاهش آلودگي القا شده توسط قارچ پني‌سيليوم ديجيتاتوم در محيط‌كشت درون‌شيشه‌اي گياهچه‌هاي سيب رقم گالا از اسانس دارچين، اسطوخودوس، مرزه، آويشن شيرازي، زيره سياه و نعناع فلفلي و همچنين دو نوع پارابن استفاده گرديد. آزمايشات اوليه نشان داد كه بهترين اسانس براي كاهش درصد جوانه‌زني اسپور قارچ، اسانس دارچين با غلظت 50 و 75 پي‌پي‌ام و ماده متيل‌پارابن و پروپيل‌پارابن با غلظت‌هاي 600 و 225 پي‌پي‌ام مي‌باشد. آزمايشات اندازه‌گيري رشد هيف، بيشترين رشد را مربوط به اسانس دارچين و كمترين را مربوط به تيمارهاي متيل‌پارابن نشان داد. در تيمارهاي مورد آزمايش جوانه‌زني اسپور بهتر از رشد هيف كنترل شد. سپس ريزنمونه‌هاي گياهان انتخابي سيب در محيط‌كشت MS همراه با اسانس و پارابن‌ها در غلظت‌هاي موردنظر كشت شدند. بهترين رشد گياه سيب در اسانس دارچين مشاهده گرديد. در مرحله بعد، تاثير پارابن‌ها يا اسانس به همراه اسپور قارچ بر رشد گياه در محيط‌كشت MS بررسي گرديد. نتايج نشان داد كه تيمارهاي متيل‌پارابن و پروپيل‌پارابن با غلظت‌هاي 600 و 225 پي‌پي‌ام در كنترل جوانه‌زني اسپور مناسب مي باشند اما قادر به ممانعت از آلودگي محيط كشت نبوده و باعث صدمه به گياه نيز مي‌شوند. به طوركلي بهترين تيمار، اسانس دارچين با غلظت 50 و 75 پي‌پي‌ام معرفي مي‌گردد.

Contamination in tissue culture is a common problem that induces the elimination of some or whole explants in tissue culture medium. The aim of this study was to eliminate or decreasing the contamination in tissue culture. In stage one, for determination of the best anti-fungi material and suitable concentration for spore germination inhibitory of Penicillium digitatum, inhibitory spore germination pre-test on MS medium was examined. Result showed that the best treatments for spore germination inhibitory were cinnamon essential oil with 50 and 75 ppm and methyl and propyl paraben at concentration of 600 and 225 ppm. In stage two, hyphe growth of Penicillium digitatum in selected treatment was evaluated. Result emphasis that in the selected treatment, spore germination was inhibited better than hyphe growth. The highest and lowest hyphe growth was related to cinnamon essential oil and methyl paraben treatment. In stage three, apple plantlets with essential oil and paraben in various concentrations were cultured on MS medium. Result showed that in the whole treatment, increasing the concentration of anti-fungal materials reduced growth properties of plants. The best growth of apple plantlets was observed in cinnamon essential oils. In stage four, the effect of paraben and essential oils with spore of Penicillium digitatum in MS medium on growth of plantlets was evaluated. Result showed that although methyl and propyl paraben at concentration of 600 and 225 ppm controlled spore germination very well but contamination in MS medium appeared. Therefore, the best treatment was cinnamon essential oil at concentration of 50 and 75 ppm.