بررسي تاثير پروپوليس بر فروكته شدن هموگلوبين انساني در شرايط آزمايشگاهي

Investigating the human hemoglobin fructation in the presence of propolis in vitro

سابقه و هدف: پروپوليس تركيب رزيني پيچيده‌اي از ترشحات گياهان مختلف است كه توسط زنبور‌ عسل جمع‌آوري و فرآوري مي‌شود؛ اين ماده داراي خواص بيولوژيك متعددي است. گلايكه شدن واكنشي است كه بين يك پروتيين و يك قند احيا ‌كننده اتفاق مي‌افتد و در نهايت موجب تغييرات ساختاري و تخريب پروتيين مي‌شود و نقش آن در ايجاد و تشديد عوارض ديابت تاييد شده است. هدف از انجام اين مطالعه بررسي اثر عصاره‌ي اتانولي پروپوليس بر ميزان فروكته شدن و تخريب ساختار هِم موجود در هموگلوبين در شرايط آزمايشگاهي است. مواد و روش‌ها: در اين مطالعه تجربي هموگلوبين تخليص شده به تنهايي و با فروكتوز در حضور و عدم حضور عصاره‌ي اتانولي پروپوليس با غلظت‌هاي 10، 20 و µg/ml40 به مدت 5 هفته انكوبه گرديد. سنجش ميزان فروكته شدن هموگلوبين از طريق اندازه گيري ميزان آزادسازي گروه هِم و جابه جايي باند سورت، توليد محصولات ناشي از تخريب هِم و نيز بررسي ساختارهاي آميلوييدي به‌كمك روش هاي طيف‌سنجي مريي-ماورا بنفش و فلويورسانس انجام شد. نتايج: انكوباسيون هموگلوبين با فروكتوز باعث تخريب ساختار هموگلوبين و رهاسازي گروه هِم شد. درحضور عصاره‌ي پروپوليس با غلظت µg/ml40 فروكته شدن هموگلوبين به ميزان 45 درصد مهار گرديد. دو غلظت كمتر عصاره ميزان مهار پايين تري را نشان دادند. هم چنين، بررسي هاي انجام‌شده در مورد محصولات ناشي از تخريب هِم و ساختار فيبريلار، نشان دهنده كاهش نسبي فروكته شدن هموگلوبين در حضور عصاره‌ي پروپوليس مي باشد. نتيجه گيري: هموگلوبين در حضور فروكتوز به شدت گلايكه مي‌شود و عصاره‌ي اتانولي پروپوليس مي‌تواند گلايكه شدن هموگلوبين را به صورت وابسته به غلظت كاهش دهد.

Background: Propolis is a complex resinous mixture that is gathered and processed by honeybees from resin they collect from trees and plants. This substance has various biological properties. Glycation is a reaction, which occurs between a protein and a reducing sugar and finally causes structural alterations and destruction of proteins. The role of glycation has been approved in the development and aggravation of diabetic complications. This study aimed to examine the effect of ethanolic extract of propolis (EEP) on fructation and destruction of hemoglobin protein structure. Materials and Methods: In this experimental study, purified hemoglobin was incubated alone and with fructose in the presence and absence of different concentrations of EEP (10, 20 and 40µg/ml) for 5 weeks. The extent of hemoglobin fructation was determined by measuring the amount of heme release, blue shift in soret band, releasing the products of heme destruction and assessing the amyloid structures using the UV-visible and fluorescence spectroscopy. Results: Incubation of hemoglobin with fructose was led to the hemoglobin destruction and heme release. Hemoglobin fructation was inhibited up to 45% in the presence of EEP with a concentration of 40µg/ml. The two lower concentrations of EEP showed the lower degrees of inhibition. Moreover, fluorescence studies of products resulting from heme degradation and fibrillar structures are indicative of the reduction in hemoglobin fructation in the presence of EEP. Conclusion: Hemoglobin is drastically glycated in the presence of fructose and EEP can decrease the hemoglobin fructation in a concentration-dependent manner.